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文檔簡介
1、擬南芥絨氈層發(fā)育及功能相關轉錄因子的調控網絡對成熟花藥發(fā)育起到重要的作用,因此,本課題基于之前對絨氈層發(fā)育調控通路的研究,進一步利用細胞學、原位雜交的技術分析了絨氈層5個轉錄因子(DYT1 TDF1 AMS MYB103 MS1)的遺傳關系,明確了其在調控網絡中的上下游關系。此外,對R2R3-MYB家族轉錄因子TD目的功能進行深入分析。首先,構建帶有MYC/FLAG標簽的基因突變體轉基因株系,并進行互補鑒定。其次,建立ChIP實驗體系,
2、預期利用ChIP技術富集能被TDF1特異識別結合的下游基因。第三,基因芯片數據顯示在tdf1突變體花苞中共有1790個基因有明顯的表達變化(其中1252個基因下調,538個基因上調),針對TDF1下調基因,通過多角度的生物信息學表達譜、功能聚類與啟動子的分析,預測若干TDF1直接調控的下游候選基因。同時,對TDF1原核蛋白進行表達及復性,并通過酵母雙雜交分析TD目的轉錄功能域。本課題實驗結果將進一步的闡明了絨氈層特異轉錄因子的調控網絡,
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