白藜蘆醇對(duì)大鼠的抗衰老作用研究.pdf

1、在有機(jī)體的衰老過程中，免疫功能出現(xiàn)下降的趨勢，特異性和非特異性免疫應(yīng)答均出現(xiàn)相應(yīng)的變化。免疫老化是一個(gè)相當(dāng)復(fù)雜的過程，已有研究表明人類壽命與機(jī)體的免疫功能密切相關(guān)，免疫系統(tǒng)是機(jī)體保護(hù)自己免受其他物質(zhì)損害的對(duì)體內(nèi)外環(huán)境的適應(yīng)和反應(yīng)體系。同時(shí)，免疫系統(tǒng)在細(xì)胞和分子水平上與細(xì)胞分化發(fā)育、腫瘤、自身免疫性疾病等過程密切相關(guān)，從根本上參與了機(jī)體老化的整個(gè)過程。白藜蘆醇（Resveratrol, RSV）屬于非黃酮類多酚化合物，是許多種子植物包括葡

2、萄和漿果在遇到不利環(huán)境中所產(chǎn)生的一種天然的植物抗毒素，實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明白藜蘆醇具有抗衰老、抗腫瘤、抗炎癥和免疫調(diào)節(jié)的作用，可以提高老齡小鼠和人的免疫功能。
　　盡管白藜蘆醇長久以來因其促進(jìn)健康，抵抗衰老和增強(qiáng)免疫的特性而受到高度評(píng)價(jià)，但是其調(diào)節(jié)免疫功能還缺乏系統(tǒng)的科學(xué)證據(jù)，其增強(qiáng)免疫功能的內(nèi)在機(jī)制不甚明確。本研究擬在于探索白藜蘆醇的口服吸收對(duì)年輕大鼠、中年大鼠和老年大鼠獲得性免疫及谷氨酰半胱氨酸連接酶的影響，為白藜蘆醇在免疫調(diào)節(jié)和抗衰

3、老領(lǐng)域的應(yīng)用建立數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。
　　在本研究中，我們使用全自動(dòng)生化分析儀和血液分析儀測定白藜蘆醇對(duì)大鼠血液學(xué)/生物化學(xué)指標(biāo)的影響，探討生理?xiàng)l件下白藜蘆醇是否影響大鼠的血液學(xué)和生物化學(xué)指標(biāo)，結(jié)果顯示白藜蘆醇的口服吸收對(duì)大鼠體重及紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板、血紅蛋白、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白等血液學(xué)指標(biāo)未造成明顯變化。
　　因遲發(fā)型免疫應(yīng)答（DTH）會(huì)隨著年齡的增加而減弱，弱DTH反應(yīng)或沒有DTH反應(yīng)常常與疾病

4、的發(fā)病率和死亡率的升高相關(guān)聯(lián)，我們采用免疫注射的方法，探討白藜蘆醇對(duì)不同年齡段大鼠的DTH應(yīng)答的影響，結(jié)果顯示白藜蘆醇能夠顯著增強(qiáng)老齡大鼠的DTH反應(yīng)。
　　老齡個(gè)體體液免疫應(yīng)答下降的主要表現(xiàn)是針對(duì)許多疫苗的免疫應(yīng)答、抗體滴度的產(chǎn)生以及抗原抗體親和力的持續(xù)下降，為探討白藜蘆醇對(duì)抗體產(chǎn)生的影響，我們采用免疫注射KLH后ELISA法檢測大鼠血清不同時(shí)間點(diǎn)抗KLH特異性IgG、IgG1和IgG2a抗體的變化，探討其對(duì)體液免疫應(yīng)答的影響，

5、結(jié)果顯示白藜蘆醇顯著增強(qiáng)老齡大鼠的抗KLH特異性IgG、IgG1和IgG2a抗體的產(chǎn)生，明顯提高了老齡大鼠對(duì)抗原的反應(yīng)性，增強(qiáng)了體液免疫應(yīng)答反應(yīng)。
　　在衰老過程中，T淋巴細(xì)胞的總數(shù)量和各亞群所占的比例發(fā)生顯著的變化，通過對(duì)大鼠脾臟中T細(xì)胞和B細(xì)胞組成進(jìn)行分析，探討白藜蘆醇可能對(duì)細(xì)胞免疫功能產(chǎn)生的影響；檢測口服白藜蘆醇后大鼠脾細(xì)胞對(duì)T細(xì)胞有絲分裂原ConA、B細(xì)胞有絲分裂原LPS和特異性抗原KLH刺激后的增殖情況，探討其對(duì)細(xì)胞增殖

6、可能的影響；結(jié)果顯示白藜蘆醇比較明顯的提高老齡大鼠CD4+T細(xì)胞的數(shù)量，提示白藜蘆醇對(duì)老齡大鼠的細(xì)胞免疫應(yīng)答可能起到調(diào)節(jié)的作用。
　　谷胱甘肽（GSH）在保持細(xì)胞的氧化還原狀態(tài)中發(fā)揮十分重要的作用，GSH的水平隨著衰老發(fā)生的變化是衰老研究中的熱點(diǎn)問題，谷氨酰-L-半胱氨酸連接酶( glutamyl-L-cysteineligase,GCL)，以前被稱為γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-glutamylcysteine synthetas

7、e,γ-GCS)，是GSH從頭合成過程中催化酶促反應(yīng)第一步反應(yīng)的催化酶，也是谷胱甘肽從頭合成過程中的限速酶，我們通過熒光定量PCR、Western Blot和酶活分析等方法研究大鼠心臟、腦和肝臟中GSH代謝過程中的關(guān)鍵酶谷氨酰半胱氨酸連接酶（GCL）催化亞基（GCLC）和調(diào)節(jié)亞基(GCLM）在不同年齡段中的變化及白藜蘆醇對(duì)老齡大鼠各組織中GCL基因表達(dá)、蛋白含量和酶活性的的影響，結(jié)果顯示在肝臟、心臟和腦組織中谷氨酰半胱氨酸連接酶催化亞基

8、和調(diào)節(jié)亞基的基因表達(dá)和蛋白含量隨著年齡增長，在中年組達(dá)到較高的水平，至老年組出現(xiàn)明顯的下降，白藜蘆醇能夠顯著提高老齡大鼠肝臟、心臟、腦中谷氨酰半胱氨酸連接酶催化亞基和調(diào)節(jié)亞基的基因表達(dá)、蛋白含量和酶活性水平。
　　綜合以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果，我們認(rèn)為適量的白藜蘆醇口服吸收在不影響血液學(xué)指標(biāo)和體重的情況下，在老齡Wistar大鼠中通過增強(qiáng)體液免疫應(yīng)答和細(xì)胞免疫應(yīng)答能夠起到的免疫調(diào)節(jié)和保護(hù)作用；通過調(diào)節(jié)老齡大鼠中谷氨酰半胱氨酸連接酶的含量和酶活