基于LIF因子探討鹿茸多肽對骨髓間充質干細胞作用的實驗研究.pdf

1、目的:本文通過分子生物實驗技術，將LIF因子轉染于骨髓間充質干細胞，探討鹿茸多肽(Pilose antler polypeptides，PAP)對大鼠骨髓間充質干細胞(bone mesenchymal stemcells，BMSCs)增殖、分化及抗氧化方面的影響并對大鼠骨髓間充質干細胞進行提取、培養(yǎng)及鑒定，觀察LIF因子對骨髓間充質干細胞的作用影響，從而為鹿茸多肽及骨髓間充質干細胞更好的應用于脊髓損傷提供了理論依據。
　　方法:將

2、大鼠進行手術造模，分離骨髓間充質干細胞，對BMSCs進行培養(yǎng)及鑒定，通過實驗，我們在光學顯微鏡觀察了分離后BMSCs的細胞形態(tài)，將BMSCs進行傳代培養(yǎng)，繪制BMSCs生長曲線，利用BMSCs的表面抗原標記物(CD34，CD44，CD90)對其鑒定，結果證實實驗分離得到細胞為大鼠BMSCs。按照試劑盒說明書，將LIF基因轉染于大鼠骨髓間充質干細胞，獲得了穩(wěn)定轉染表達LIF的BMSCs，通過MTT比色，檢測SOD、MDA活性，細胞信號通路

3、檢測及免疫組化檢測，觀察鹿茸多肽對骨髓間充質干細胞的作用影響。
　　結果:本實驗成功分離、培養(yǎng)并鑒定了大鼠BMSCs;研究發(fā)現，鹿茸多肽可以提高細胞活力，但是轉染LIF基因后，細胞活力顯著降低，鹿茸多肽也無法升高其細胞活力，說明鹿茸多肽促進骨髓間充質干細胞活力的影響可能是通過LIF基因發(fā)揮作用了;鹿茸多肽通過對SOD、MDA的調節(jié)，實現其對細胞的抗氧化作用，且這些作用可能是通過LIF基因實現的;鹿茸多肽可以促進大鼠BMSCs的增殖

4、、分化，轉染LIF基因后的骨髓間充質干細胞加入鹿茸多肽后，未影響骨髓間充質干細胞的增殖、分化。
　　結論:①鹿茸多肽可以提高骨髓間充質干細胞的細胞活力。
　　②鹿茸多肽可以提高骨髓間充質干細胞的抗氧化應激活性。
　?、勐谷锥嚯目梢蕴岣呤构撬栝g充質干細胞的抗炎活性。
　?、軐IF因子轉染于骨髓間充質干細胞，鹿茸多肽未影響骨髓間充質干細胞的增殖、分化，所以考慮可以將轉染LIF因子的骨髓間充質干細胞作為細胞移植的載體