KLF12調(diào)控子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞周期與遷移能力及其機(jī)制探討.pdf

1、研究目的：
　　子宮內(nèi)膜癌(Endometrial Cancer，EC)是全球范圍內(nèi)最常見的婦科惡性腫瘤之一，局部復(fù)發(fā)、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移成為影響患者生存的重要因素。因此，對(duì)子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展及侵襲轉(zhuǎn)移的研究顯得至關(guān)重要。
　　KLF12是KLF家族成員之一，作為真核生物的轉(zhuǎn)錄因子，參與腎臟發(fā)育，脂代謝，子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞蛻膜化，腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲、失巢凋亡等多種生物學(xué)進(jìn)程。
　　本研究從臨床樣本調(diào)查、體外細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)及其相關(guān)分子

2、機(jī)制三個(gè)層面，明確KLF12的表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展的相關(guān)性;闡明KLF12對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞周期及相關(guān)分子的調(diào)控;明確KLF12對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞遷移能力及Notch/EMT相關(guān)分子的調(diào)控作用，為評(píng)估KLF12/Notch/EMT通路相關(guān)分子是否可以作為臨床診治的新靶點(diǎn)提供理論依據(jù)。
　　研究方法：
　　1.通過qRT-PCR和免疫組化，檢測(cè)子宮內(nèi)膜癌及正常內(nèi)膜組織中KLF12的mRNA及蛋白水平的表達(dá)差異;通過半定量統(tǒng)計(jì)免

3、疫組化中KLF12分子的表達(dá)情況，探究KLF12與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征及免疫組化標(biāo)志分子表達(dá)的相關(guān)性。
　　2.干擾KLF12表達(dá)后，通過流式細(xì)胞周期檢測(cè)兩種子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系(高分化子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系Ishikawa及中分化子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系Hec-1b)的細(xì)胞周期分布;qRT-PCR、Western Blot檢測(cè)過表達(dá)KLF12后細(xì)胞周期相關(guān)分子表達(dá)情況。
　　3.通過細(xì)胞劃痕和Transwell等實(shí)驗(yàn)方法，檢測(cè)過表達(dá)KLF

4、12后，兩種子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系(高分化子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系Ishikawa及中分化子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系Hec-1b)的遷移能力的變化;通過qRT-PCR、Western Blot方法探究過表達(dá)KLF12對(duì)Notch/EMT通路相關(guān)分子的調(diào)控。
　　研究結(jié)果：
　　1.在子宮內(nèi)膜癌組織中，KLF12的表達(dá)增高，ER受體的表達(dá)在不同程度的KLF12表達(dá)中存在差異。
　　2.si-KLF12導(dǎo)致子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞Ishikawa與Hec-

5、1b的G2/M期阻滯;過表達(dá)KLF12促進(jìn)了子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞Ishikawa與Hec-1b的G2/M期相關(guān)分子CyclinB1/CDK1的表達(dá)。
　　3.過表達(dá)KLF12能夠顯著促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞Ishikawa與Hec-1b的遷移能力，并參與調(diào)控Notch/EMT通路相關(guān)分子的表達(dá)。
　　研究結(jié)論：
　　本研究證實(shí)KLF12在子宮內(nèi)膜癌組織中表達(dá)升高;子宮內(nèi)膜癌組織中ER的表達(dá)在不同程度的KLF12的表達(dá)組之間存在差異