補(bǔ)腎健脾，解毒利咽法對(duì)IgA腎病模型大鼠腎組織IgA1、TfR、TGF-β、IL-6影響的研究.pdf

1、目的:
　　觀察補(bǔ)腎健脾，解毒利咽法對(duì)IgA腎病模型大鼠腎組織中IgA1、TfR、TGF-β、IL-6的含量變化的影響，從而更加深入的研究與探討，補(bǔ)腎健脾，解毒利咽法對(duì)于IgA腎病治療的療效作用與機(jī)理，為中醫(yī)中藥治療IgA腎病奠定理論基礎(chǔ)。
　　方法:
　　選取Wistar雄性大鼠80只，體重180±20g，購(gòu)回后適應(yīng)性的喂養(yǎng)1周，用分層隨機(jī)的方法將大鼠分為空白組10只，造模組70只?？瞻捉M:從實(shí)驗(yàn)開(kāi)始之日起，以4ml

2、/kg蒸餾水灌胃隔日1次，共持續(xù)8周;皮下注射0.9％氯化納溶液0.4ml/只，每周1次，持續(xù)9周;于第6周尾靜脈注射0.9％氯化納溶液0.2ml/只。第10周起，給予4ml/(kg·d)生理鹽水灌喂，每日1次，持續(xù)12周末。造模組采取陸慧渝[1]等報(bào)道的方法，將牛血清白蛋白(BSA)結(jié)晶粉以蒸餾水配成100g/L濃度的稀釋液體，從實(shí)驗(yàn)開(kāi)始之日，以4ml/kg灌胃隔日1次，共持續(xù)8周;將四氯化碳(CCL4)與蓖麻油，以1∶3的比例混合均

3、勻，以0.4ml/只皮下注射，每周1次，共持續(xù)9周;將脂多糖(LPS)以0.9％NaCl配成0.25g/L的溶液，于第6周每只尾靜脈注射0.2ml。第9周末隨機(jī)選取12只大鼠，其中造模組10只及空白組2只進(jìn)行驗(yàn)?zāi)！Ｓ^察指標(biāo):(1)檢測(cè)各組大鼠24小時(shí)尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)及尿蛋白定量(UTP);(2)檢測(cè)大鼠血清腎功能、肝功能的變化情況;(3)采用ELISA法和免疫組化法檢測(cè)腎組織中IgA1、轉(zhuǎn)鐵蛋白(TfR)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β)、白

4、介素6（IL-6）含量變化及定位表達(dá);(4)應(yīng)用光鏡觀察各組大鼠腎組織病理形態(tài)學(xué)改變。
　　結(jié)果:
　　(1)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中大鼠共死亡22只，其中驗(yàn)證模型處死12只大鼠，造模過(guò)程中死亡10只。(2)觀察空白組大鼠在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中一般狀態(tài)良好，無(wú)明顯異常狀態(tài)表現(xiàn);模型組大鼠給予四氯化碳皮下注射后表現(xiàn)為精神萎靡，腹瀉，尿液顏色加深，大鼠的毛發(fā)雜亂不光澤，大鼠口鼻、皮膚淺表處有血性分泌物，大鼠的體重也有明顯下降等表現(xiàn)。經(jīng)過(guò)治療2～3周

5、后各治療組大鼠一般狀態(tài)好轉(zhuǎn)，腹瀉癥狀減少，尿液顏色也較之前澄清，大鼠的體重較之前有所增加。(3)空白組中大鼠沒(méi)有出現(xiàn)血尿及蛋白尿癥狀，造模組中大鼠24小時(shí)RBC及24小時(shí)UTP有明顯升高，各治療組大鼠有所下降(P＜0.05)，組間比較治療組與洛汀新對(duì)照組有明顯差異(P＜0.05)。(4)空白組:大鼠腎組織內(nèi)，除血管內(nèi)皮外，未見(jiàn)到IgA分子的沉積。造模組:大鼠腎組織內(nèi)，可見(jiàn)明顯的IgA分子與熒光物質(zhì)結(jié)合形成的線狀或點(diǎn)狀的熒光亮點(diǎn)，這些熒光

6、物質(zhì)成線性排列。(5) IgA腎病模型大鼠腎組織內(nèi)，可見(jiàn)明顯的IgA1、TfR、TGF-β、IL-6分子的沉積與空白組比較明顯升高。(6)各治療組大鼠經(jīng)治療后IgA1、TfR、TGF-β、IL-6的水平明顯下調(diào)(P＜0.05)，組間比較，補(bǔ)腎健脾，解毒利咽高、中低劑量組及洛汀新對(duì)照組比較有明顯差異(P＜0.05)。(7)各組大鼠之間比較，腎功能及肝功能在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上無(wú)差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論:
　　(1)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中通

7、過(guò)采用牛血清白蛋白灌胃及四氯化碳、脂多糖注射的方法，成功復(fù)制IgA腎病動(dòng)物模型。
　　(2)補(bǔ)腎健脾，解毒利咽組能有效的降低24小時(shí)尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)及24小時(shí)尿蛋白排泄率;其中以中藥組療效優(yōu)于洛汀新組。
　　(3)IgA腎病模型大鼠腎組織中IgA1、TfR、TGF-β、IL-6的水平與空白組比較顯升高，經(jīng)給藥治療后IgA1、TfR、TGF-β、IL-6的水平有所下調(diào)，與病情呈負(fù)相關(guān);說(shuō)明IgA1、TfR、TGF-β、IL-6的異