穿心蓮內酯自乳化釋藥系統(tǒng)的研制及其在Caco-2細胞模型的轉運機制研究.pdf

1、穿心蓮內酯具有抗菌消炎、抗病毒、抗腫瘤、免疫調節(jié)等功能，在其實際的臨床應用中，其抗菌消炎作用顯得最為突出。然而，由于穿心蓮內酯存在水溶性差、口服生物利用度低等缺點，導致其抗菌消炎作用在臨床上的應用局限于胃腸道細菌性感染的局部性治療，為了擴大穿心蓮內酯的臨床應用范圍，有必要借助合適的藥劑學手段改善其吸收方面的不足。本實驗制備了穿心蓮內酯自微乳化釋藥系統(tǒng)，希望通過借助該藥劑學手段解決穿心蓮內酯的上述不足。本實驗主要的研究內容和結果如下：

2、r>　　1、建立穿心蓮內酯的HPLC含量測定方法，并在此基礎上考察了穿心蓮內酯的油水分配系數(shù)，以及pH、溫度等因素對藥物穩(wěn)定性和溶解度的影響。實驗結果顯示，穿心蓮內酯的表觀油水分配系數(shù)P＝3.90；穿心蓮內酯在堿性條件下易被破壞，而酸性條件特別是在pH3~4的酸性條件下最為穩(wěn)定；調節(jié)溶媒體系的pH值對穿心蓮內酯的溶解度影響很小；穿心蓮內酯在60℃以上易被破壞，而50℃左右藥物的穩(wěn)定性和載藥速度均較為優(yōu)異。上述結果提示，穿心蓮內酯的細胞膜

3、透性能較好；將自乳化體系的pH控制在酸性條件有利于延長藥物的保質期；難以通過調控自乳化體系的pH改善穿心蓮內酯的溶解度；穿心蓮內酯自乳釋藥系統(tǒng)的的載藥過程應在60℃以下進行。
　　2、通過溶解度試驗、組分間的相容性試驗和三元相圖的繪制，實驗初步篩選出了自乳化處方的組分種類；在此基礎上，以微乳的粒徑大小、Zeta電位和自乳化時間為評價指標，通過星點設計-效應面法對上述處方的組分配比進行了優(yōu)化，篩選出了自乳化性能較為突出的處方；在篩選

4、出的自乳化處方基礎上，以藥物的體外溶出度為評價指標，并以HPMC為沉淀抑制劑，對穿心蓮內酯自乳化處方的沉淀抑制能力進行了進一步的優(yōu)化；對優(yōu)化的穿心蓮內酯自乳化處方的理化性質和體外溶出進行測定。
　　經處方篩選和星點設計-效應面法優(yōu)化得出的最佳處方為Maisine35-1:Tween20:TranscutolP＝14.29:39.68:46.03；體外溶出試驗顯示，10min左右開始有藥物的析出，而添加2％的HPMC可有效減少溶出過

5、程的藥物析出，維持藥物在自乳化體系中的過飽和溶解狀態(tài)；穿心蓮內酯自微乳（含2%HPMC）的平均粒徑為19.96nm，自乳化時間＜20s，Zeta電位﹣9.76mv，1h累計溶出百分率為94.63%，約為市售滴丸的2.14倍。
　　3、建立Caco-2細胞體外吸收模型，研究穿心蓮內酯自微乳在Caco-2細胞模型中的跨膜轉運機制，預測其提高藥物生物利用度的能力。首先，采用細胞形態(tài)學、跨膜電阻值、甘露醇透過率和堿性磷酸酶活性等指標對細胞

6、模型進行檢測。實驗結果表明，在本實驗條件培養(yǎng)21天后，Caco-2細胞模型的細胞間形成緊密連接，跨膜電阻值穩(wěn)定在600Ωcm2附近，甘露醇透過率處于0.3%·h-1·cm2以下，腸腔側堿性磷酸酶的活性顯著高于基底側酶的活性（P＜0.05）。上述結果表明，實驗所構建的Caco-2細胞模型完整性良好，可作為小腸跨膜轉運的體外模型。
　　采用符合轉運條件的Caco-2細胞模型進行穿心蓮內酯的轉運研究，考察穿心蓮內酯自乳化給藥系統(tǒng)對藥物跨

7、膜轉運的促進作用，以及藥物濃度、溫度和p-gp抑制劑對藥物轉運的影響。結果顯示，本實驗所制備的穿心蓮內酯自微乳化給藥系統(tǒng)的Papp(AP-BL)值較穿心蓮內酯水溶液增加了5倍左右；濃度和溫度的改變對藥物的Papp值基本沒有影響；加入p-gp抑制劑后，穿心蓮內酯外排率(ER)由0.93降為0.76，減少了18.3%。上述實驗結果表明，本實驗制備的穿心蓮內酯自微乳化給藥系統(tǒng)能促進藥物的跨膜轉運；穿心蓮內酯在Caco-2細胞模型中的轉運機制主