噪聲引起的耳蝸損傷及表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)的防護作用.pdf

1、噪聲可使聽功能發(fā)生不可逆性喪失，導致噪聲性聾(NIHL)。噪聲暴露后，耳蝸內(nèi)產(chǎn)生大量自由基，其發(fā)生氧化應激導致毛細胞死亡。如一氧化氮自由基(NO)被氧化為過氧亞硝基陰離子，后者進一步硝基化，生成3-硝基酪氨酸(3-NT)。
　　綠茶中的茶多酚有很強的抗氧化活性，表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）是其中抗氧化作用最強的成分，具有抗炎、抗衰老、抗突變、抗癌、保護神經(jīng)及清除體內(nèi)自由基等作用。在本課題中，對豚鼠行預防性腹腔注射EGCG，

2、從聽功能和形態(tài)學兩方面研究其對噪聲性聾的防護作用。
　　一、噪聲引起的聽力損失及EGCG對聽功能的保護
　　目的:建立噪聲性聾動物模型，探究EGCG對豚鼠噪聲性聽力損失的防護作用。方法:45只豚鼠隨機分為3組:EGCG+噪聲組，生理鹽水+噪聲組，正常對照組。EGCG+噪聲組和生理鹽水+噪聲組豚鼠在接受噪聲暴露(120 dB SPL,4h)前一日及每次暴露前1h分別腹腔注射EGCG和生理鹽水(25mg/1000g)，正常對照組

3、不予噪聲暴露。噪聲暴露后，檢測三組豚鼠聽性腦干反應(ABR)來評估豚鼠聽力下降程度。結果:正常對照組豚鼠ABR閾值為22±2.74 dB SPL，EGCG+噪聲組豚鼠ABR閾值為52.00±9.03 dB SPL，生理鹽水+噪聲組豚鼠ABR閾值為71.00±4.18 dB SPL，兩組間有顯著的統(tǒng)計學差異。噪聲暴露后的第1、3、7和14天進行ABR檢測，EGCG+噪聲組和生理鹽水+噪聲組豚鼠ABR閾值均有一定程度的恢復，但前者ABR閾值

4、均較后者更低。以短純音(Toneburst)為刺激聲，兩組豚鼠ABR閾值在2k、4k、8k、16k各頻率均具有統(tǒng)計學差異。結論:預防性腹腔注射EGCG可減輕噪聲引起的聽力損失。
　　二、噪聲引起的耳蝸形態(tài)學變化及EGCG的防護作用
　　目的:觀察噪聲引起的耳蝸3-NT增加及其導致的外毛細胞損傷，探究預防性腹腔注射EGCG的防護作用。方法:通過DAPI染色細胞核、鬼筆環(huán)肽(Phalloidin)染色細胞骨架并行外毛細胞計數(shù)，3

5、-硝基酪氨酸(3-NT)染色、外毛細胞運動蛋白(Prestin)染色對比各組豚鼠耳蝸內(nèi)3-NT差異及細胞結構的變化。最后進行半定量，比較組間差異。結果:60倍激光共聚焦顯微鏡下成像并計數(shù)外毛細胞，正常對照組為60.1±0.71個，生理鹽水+噪聲組為43.5±2.39個，EGCG+噪聲組為53.9±1.63個。組間差異具有統(tǒng)計學意義。IHC染色顯示，與生理鹽水+噪聲組相比，EGCG+噪聲組豚鼠外毛細胞形態(tài)較好，Prestin染色清晰，3-