BMSCs通過增強自噬發(fā)揮神經(jīng)保護作用.pdf

1、目的:骨髓基質(zhì)細胞（BMSCs）是具有神經(jīng)保護作用的多能干細胞，盡管細胞分化替代及旁分泌機制被廣泛認可，但是它真正的神經(jīng)保護作用的機制并不清楚，本文就是為了探討B(tài)MSCs是否可以通過自噬增強來發(fā)揮神經(jīng)保護作用。
　　材料與方法:利用分子克隆技術與慢病毒轉(zhuǎn)染的方法獲得過表達人野生型及致病突變A53Tα-突觸核蛋白（α-synuclein）單克隆人神經(jīng)母細胞瘤SH-SY5Y細胞株；穩(wěn)定過表達突變型A53Tα-synuclein的SH-

2、SY5Y細胞經(jīng)氧化呼吸鏈抑制劑魚藤酮處理后與BMSCs共培養(yǎng)，MTT法測定共培養(yǎng)組與非共培養(yǎng)組細胞存活率變化；蛋白免疫印跡法觀察自噬水平和α-synuclein變化；Annexin V-PE/7-AAD雙染流式細胞術測定細胞凋亡率變化。自噬抑制劑3-MA和自噬誘導劑雷帕霉素預處理24小時后與BMSCs共培養(yǎng)觀察以上指標的變化。
　　結(jié)果:魚藤酮會降低過表達A53Tα-synuclein的SH-SY5Y細胞存活率，呈時間與劑量依賴性

3、，BMSCs可以保護細胞免受魚藤酮引起的細胞損傷；BMSCs可以增強A53T細胞的自噬水平和減少α-synuclein的聚集；BMSCs還可以降低魚藤酮引起的細胞凋亡。自噬誘導劑雷帕霉素可以增強BMSCs細胞保護作用、增強自噬和降低凋亡率，相反自噬抑制劑3-MA降低BMSCs的細胞保護作用，抑制自噬，增加細胞的凋亡率。
　　結(jié)論:BMSCs通過增強自噬降低α-synuclein的水平，進而提高細胞的存活率，降低細胞凋亡率。BMSC