PD-1-PD-L1通路在原發(fā)性膽汁性膽管炎免疫機制中的作用.pdf

1、目的：探究程序性死亡受體-1（Programmed death-1，PD-1）及其配體1(PD-1ligand1，PD-L1)在原發(fā)性膽汁性膽管炎（Primary Biliary Cholangitis，PBC）免疫機制中的作用。
　　方法：收集PBC患者外周血和肝臟病理標本，流式細胞術檢測PD-1在PBC患者CD8+T細胞和Treg細胞的表達情況，免疫熒光共定位檢測PD-L1在肝臟膽管細胞表達情況，ELISA測定血漿中PD-1/

2、PD-L1通路相關細胞因子表達水平，RT-PCR法測定CD8+T淋巴細胞中PD-1/PD-L1通路相關調控通路的表達。通過體外細胞共培養(yǎng)，探究PD-1/PD-L1通路調控在CD8+細胞毒細胞中對PBC靶細胞人肝內膽管上皮細胞殺傷作用中的作用。
　　結果：本研究共入組就診于北京協(xié)和醫(yī)院的PBC患者69例，健康對照者58例。PBC患者外周血CD8+T淋巴細胞PD-1表達（12.0±8.8％）比健康對照（19.9±12.5％）降低(p＜

3、0.001)，PBC患者Treg細胞比例（5.6±3.7％）較健康對照（7.4±2.4％）顯著下降(p=0.005)，且PD-1+細胞占FoxP3+CD4+T細胞比例顯著升高（29.9±11.8％v.s.25.8±8.1％，p=0.044）。PBC組血漿IL-10濃度、IFN-γ濃度、TGF-β濃度高于健康對照（IL-108.29±9.00pg/ml v.s.4.43±5.08pg/ml，p=0.0066;IFN-γ51.94±52.9

4、4pg/ml v.s.26.71±26.26pg/ml,p=0.0015;TGF-β1302.0±1972.8pg/ml v.s.205.8±298.9pg/ml，p=0.0018）。RT-PCR測定發(fā)現(xiàn)PBC組(n=21)較健康對照組(n=19)CD8+T淋巴細胞Tbet基因表達量升高（3.03±4.23v.s.0.82±0.76，p=0.028），Pdcd1基因表達有下降趨勢，但無統(tǒng)計學意義（0.59±0.73v.s.1.49±2.

5、20，p=0.110）。肝臟免疫熒光共定位發(fā)現(xiàn)，PBC患者組肝臟內PD-L1陽性細胞較少，未見膽管細胞與PD-L1雙陽性細胞。在與HiBEC共培養(yǎng)體系中，PD-1+CD8+T細胞較PD-1-CD8+T細胞細胞毒殺傷能力弱，增殖下降，TGF-β、IFN-γ有下降趨勢，且靶細胞凋亡相對較少，這種效應在一定程度上可以被抗PD-1抗體拮抗，而在PD-L1促進下有所增強。
　　結論：在PBC的發(fā)病的免疫機制中，PD-1上游核內轉錄因子Tbe