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文檔簡介
1、目的:通過分析研究FKBP38(FK506 Binding Protein38)基因肝臟特異敲除小鼠模型,探討FKBP38對肝臟功能的影響。
方法:
1.利用胚胎注射法構建攜帶loxP位點的FKBP38轉基因小鼠。將此小鼠與攜帶肝臟實質細胞特異性表達的Alb-Cre小鼠交配,獲得FKBP38基因肝臟特異敲除小鼠模型Alb-Cre:FKBP38fl/fl。同時利用PCR,RT-qPCR和Western Blot的方法對
2、FKBP38肝臟特異性敲除鼠進行鑒定。
2.采用Western Blot,TUNEL,ELISA,檢測空腹血糖的方法分析FKBP8缺失對肝臟功能的影響。
3.對小鼠肝臟組織進行組織病理學分析。
結果:
1.FKBP38肝臟特異敲除小鼠FKBP38-/-肝臟中FKBP38基因的mRNA,蛋白表達水平相對于同年齡同窩野生型小鼠具有統(tǒng)計學差異(P<0.001)。
2.FKBP38肝臟特異敲除小
3、鼠FKBP38-/-肝臟中,轉錄和翻譯相關蛋白水平相較于對照組小鼠,p70 S6K的磷酸化水平上調,4EBP-1的磷酸化水平則被下調。
3.與對照組相比較,F(xiàn)KBP38肝臟特異敲除小鼠FKBP38-/-的體重無統(tǒng)計學差異,空腹血糖水平在5月齡和10月齡顯著降低。
4.FKBP38肝臟特異敲除小鼠FKBP38-/-肝臟中,凋亡相關蛋白BCL-2與對照組比較,未見差異化表達,細胞凋亡也未見顯著差異。
5.FKB
4、P38肝臟特異敲除小鼠FKBP38-/-肝臟中,小鼠肝功能指標谷草轉氨酶AST和谷丙轉氨酶ALT水平相較于對照組未見顯著差異。
6.FKBP38肝臟特異敲除小鼠FKBP38-/-肝臟病理學分析,未見組織顯著增生性病變,單位面積細胞核數(shù)量則比野生型小鼠有顯著減少。
結論:
1.FKBP38肝臟特異敲除小鼠模型構建成功。
2.肝臟中缺失FKBP38,小鼠的空腹血糖水平顯著下降。
3.小鼠肝臟
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