基于結(jié)構(gòu)的組蛋白去乙?；负图谆D(zhuǎn)移酶雙靶點抑制劑的設(shè)計、合成和活性研究.pdf

1、目的：組蛋白去乙?；负徒M蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶是和多種癌癥相關(guān)的兩個關(guān)鍵靶點酶，研究發(fā)現(xiàn)多靶點抗癌藥物不僅可以提高治療效果，而且可以避免多種藥物聯(lián)合用藥時可能產(chǎn)生的相互作用，降低副作用，在癌癥治療方面具有重要意義。本實驗研究目的是設(shè)計合成一些新型雙靶點抗癌化合物，可以同時抑制兩個靶點蛋白的活性。不僅可以達到治療癌癥的目的，而且為多靶點藥物的開發(fā)研究提供基礎(chǔ)。
　　方法：首先，在化合物設(shè)計方面采用藥效團拼合的方法去設(shè)計雙靶點抗癌化合物。其

2、次，在合成化合物路線方面通過借鑒文獻以及查閱 Scifinder的方法來設(shè)計化合物合成的路線。再次，在后期的生物活性檢測方面，運用抗增殖毒性實驗、In Cell-western以及酶活性研究來檢測化合物的毒性以及對于靶點酶的抑制作用。最后本文應(yīng)用計算機輔助技術(shù)來研究化合物的成藥性以及和與靶點蛋白結(jié)構(gòu)的結(jié)合模式。
　　結(jié)果：本文運用藥效團拼合的原理，基于靶點組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑BIX-01294的母核喹唑啉雙環(huán)和組蛋白去乙酰化酶抑

3、制劑伏立諾他Vorinostat改造，成功設(shè)計了三個系列的目標(biāo)化合物。通過借鑒文獻以及查閱Scifinder，根據(jù)化合物的結(jié)構(gòu)特點，成功設(shè)計出五條合成路線?；衔锓謩e以2,4-二氯-6,7-二甲氧基喹唑啉和4-甲氧基-2-氨基苯甲酸等為原料，成功合成了23個目標(biāo)化合物，所有的全新中間體和目標(biāo)化合物經(jīng)過了1H-NMR和13C-NMR的結(jié)構(gòu)驗證。對于化合物的后期活性測試實驗，經(jīng)過細(xì)胞抗增殖毒性實驗、In Cell-western以及酶活性研

4、究結(jié)果顯示，化合物QZ-8(14)表現(xiàn)出良好的生物活性篩選結(jié)果，細(xì)胞抗增殖實驗中，QZ-8(14)對于腫瘤細(xì)胞(MDA-MB-231、MCF-7、A549、HCT-8)的EC50值分別約為10μM、37μM、36μM、73μM左右；對于HDAC的IC50只有6μM左右；在In Cell-western實驗中對于G9a的IC50只有7μM左右。通過生物活性實驗篩選出來的化合物 QZ-8(14)經(jīng)過計算機輔助藥物設(shè)計軟件Discovery

5、Studio的ADME預(yù)測功能的預(yù)測結(jié)果，成藥性良好；運用Schr?dinger Suite軟件把 QZ-8(14)與蛋白晶體結(jié)構(gòu)精密分子對接研究結(jié)果表明，化合物 QZ-8(14)和雙靶點的結(jié)合模式都非常好，可以和雙靶點蛋白之間產(chǎn)生良好的相互作用。
　　結(jié)論：本研究運用藥效團拼合原理成功設(shè)計了一批組蛋白去乙?；负徒M蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶雙靶點抑制的目標(biāo)化合物，經(jīng)過借鑒文獻及 Scifinder等資料成功合成了23個全新的目標(biāo)化合物，合成