有氧運動與黑果枸杞多糖改善小鼠阻塞性黃疸致肝損傷的研究.pdf

1、研究目的:
　　本課題選用阻塞性黃疸模型小鼠為實驗對象，以黑果枸杞多糖或有氧運動的干預方式，探討NF-κB信號通路在小鼠阻塞性黃疸致肝損傷的機理及闡述運動聯(lián)合黑果枸杞多糖改善肝損傷的效果，為阻塞性黃疸的輔助療法提供一種新的可行性實驗基礎(chǔ)和新的理論方向。
　　研究方法:
　　50只KM小鼠隨機分為5組:假手術(shù)組10只(B組）、模型組10只(M組）、枸杞組10只（G組）、有氧運動組10只（Y組）、枸杞+運動組10只（G+Y

2、組）。其中除假手術(shù)組外都以總膽管懸掛至腹壁48小時構(gòu)建小鼠阻塞性黃疸的模型。枸杞組、枸杞+運動組小鼠于膽總管結(jié)扎術(shù)后2天進行黑果枸杞多糖灌胃，每天固定時間點，劑量為0.3 ml/次進行灌胃1次，共6W。有氧運動組、枸杞+運動組小鼠進行坡度為0％、速度為10m/min無負重訓練，每天30min、每周不連續(xù)訓練6天、保持6周的跑臺的運動方案。干預結(jié)束后小鼠取材前一天晚上禁食處理，取材前先進行稱重，麻醉完全后分離出肝臟組織，應用蘇木精-伊紅染

3、色對比小鼠肝臟組織形態(tài)及結(jié)構(gòu)的病理改變;免疫組化法檢測肝臟組織NF-κB P65、NF-α的表達;Realtime-PCR技術(shù)檢測肝組織中核因子κB(NF-κB)、TNF-α、IκB激酶IKK-α，NF-κB的抑制蛋白IκB-α表達;血液生化檢測血清總膽紅素(TBIL)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)的含量。
　　研究結(jié)果:
　　1.血清學結(jié)果:枸杞+運動組TBIL、ALT、AST含量較模型組顯著降低(P＜0.0

4、1)，枸杞組、有氧運動組的含量較模型組也有所下降(P＜0.05)。
　　2.HE染色顯示:假手術(shù)組小鼠肝細胞索呈放射狀排列;模型組小鼠的肝細胞發(fā)生萎縮，肝索斷裂，核固縮等，間質(zhì)可見紅細胞堆積;有氧運動組、枸杞組可見肝小葉結(jié)構(gòu)不規(guī)則，肝索排列欠整齊，局部可見變性的脂肪細胞;枸杞+運動組效果最為顯著，肝小葉完整，無變形及壞死現(xiàn)象。
　　3.免疫組織化學結(jié)果顯示: NF-κB P65、TNF-α在假手術(shù)組小鼠肝組織中幾乎不表達較模

5、型組顯著性降低(P＜0.01）;枸杞+運動組較枸杞組、有氧運動組、枸杞+運動組低(P＜0.01）。
　　4.Real-time PCR結(jié)果顯示:三個干預組與模型組比較，NF-κB、TNF-α、IKK-α mRNA表達明顯增加(P＜0.01），枸杞+運動組表達量高與枸杞組和有氧運動組(P＜0.01)，IκB-α的表達成相反趨勢。TNF-α和NF-kBP65的表達成正相關(guān)，和Iκ B-α的表達成負相關(guān)。
　　結(jié)論:
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