奧沙利鉑對不同轉(zhuǎn)移潛能的人結(jié)腸癌細胞株增殖和凋亡的影響.pdf

1、目的:
　　探討奧沙利鉑（L-OHP）體外對人結(jié)腸癌細胞SW480和SW620增殖和凋亡的影響及其可能機制。
　　方法:
　　1.MTT比色法檢測用不同質(zhì)量濃度(2、4、8、16、32和64μ g/mL)L-OHP與SW480和SW620細胞作用24、48和72 h后對增殖抑制作用的影響。
　　2.DAPI染色觀察經(jīng)不同質(zhì)量濃度（4、16和64μ g/mL）L-OHP處理24 h后細胞核形態(tài)的變化。
　　3

2、.流式細胞術(shù)檢測用不同質(zhì)量濃度（1/2IC50和IC50）L-OHP處理24 h后SW480和SW620細胞周期和凋亡率。
　　4.Western blot法檢測經(jīng)不同質(zhì)量濃度（4、16和64μ g/mL）L-OHP處理24 h后SW480和SW620細胞中凋亡相關(guān)蛋白Bax和Caspaes-3蛋白的表達水平以及DNA損傷相關(guān)蛋白γ HA2X蛋白的表達水平。
　　結(jié)果:
　　1.L-OHP對SW480和SW620細胞的

3、增殖有明顯的抑制作用且呈時間-劑量依賴性（P＜0.05）。SW620細胞對L-OHP的敏感性明顯高于SW480細胞（P＜0.05）。
　　2.L-OHP作用于SW480和SW620細胞24 h后，隨著藥物濃度的增加正常細胞數(shù)目減少，出現(xiàn)細胞核固縮、多核、核碎裂及凋亡小體的細胞數(shù)目明顯增加（P<0.05）。相同濃度L-OHP作用下，SW620細胞中出現(xiàn)細胞核固縮、多核、核碎裂及凋亡小體的細胞的比例明顯較SW480細胞中高（P<0.0

4、5）。
　　3.L-OHP對SW480和SW620細胞的有明顯的促進早期凋亡的作用且呈時間-劑量依賴性（P＜0.05）。相同濃度 L-OHP作用下對 SW620細胞促進早期凋亡的作用明顯大于SW480細胞（P<0.05）。
　　4.自然對數(shù)增殖周期，SW620細胞 S期細胞比例低于 SW480細胞，而G1期細胞比例高于SW480細胞（P<0.05）。用不同質(zhì)量濃度的L-OHP（1/2IC50、IC50）作用24 h,SW48

5、0細胞G1期細胞比例隨濃度增高而顯著降低，G2/M期細胞比例顯著升高（P<0.05），SW620細胞G1期細胞比例隨濃度增高而顯著降低。S期細胞比例顯著升高（P<0.05）。
　　5.L-OHP作用于SW480和SW620細胞24 h后，隨著藥物濃度的增加SW480和SW620細胞中凋亡相關(guān)蛋白Bax和Caspase-3蛋白以及DNA損傷相關(guān)蛋白γHA2X蛋白的表達量明顯增加（P<0.05）。相同藥物濃度下SW620細胞中凋亡相關(guān)

6、蛋白Bax和Caspase-3蛋白以及DNA損傷相關(guān)蛋白γ HA2X蛋白的表達量明顯較SW480高（P<0.05）。
　　結(jié)論:
　　1.L-OHP對二種結(jié)腸癌細胞株都有明顯的增殖抑制作用，且對 SW620細胞的抑制作用明顯大于SW480細胞。
　　2.L-OHP主要通過阻滯細胞于G2/M期或S期抑制二種腫瘤細胞增殖并誘導細胞凋亡。
　　3.L-OHP誘導二種腫瘤細胞凋亡的機制可能是通過上調(diào)促凋亡蛋白Bax和啟動