NES1基因超甲基化在肝癌發(fā)病機制中的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：探討NES1基因在正常肝細胞和肝癌細胞株中的表達、甲基化狀態(tài)，及甲基化對基因表達和細胞生物學的影響。
　　方法：用RT-PCR和RT-QPCR檢測NES1mRNA在正常肝細胞L02以及肝癌細胞株HepG2中的表達水平，用MSP檢測NES1基因的甲基化水平。用去甲基化藥物（5-aza-dC）處理肝癌細胞株后,再用RT-QPCR檢測NES1mRNA的表達水平，MTT法檢測細胞的存活率，Western Blot檢測cyclinD1

2、,P21,P53表達水平。
　　結(jié)果：NES1mRNA在正常肝細胞中的表達水平明顯高于肝癌細胞株。肝癌細胞株中NES1外顯子3 CpG島的甲基化水平較正常肝細胞明顯升高。肝癌細胞株經(jīng)去甲基化藥物處理后，NES1 mRNA表達水平明顯上升，細胞的存活率明顯下降,P21,P53表達水平明顯上升, cyclinD1表達水平明顯下降。
　　結(jié)論：NES1基因外顯子3 CpG島的超甲基化和它在肝癌細胞株中的低表達相關(guān)，在肝癌細胞中NE

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