從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑探討益氣除痰方對肺癌未折疊蛋白反應(yīng)相關(guān)蛋白ATF6、XBP1、CNX的影響.pdf

1、背景：惡性腫瘤已成為威脅人類健康的常見疾病之一。根據(jù)世界衛(wèi)生組織發(fā)布的報告，肺癌的發(fā)病及死亡是惡性腫瘤的第一位，且仍在不斷上升，因此肺癌的防治成為全世界廣泛關(guān)注的問題。目前針對肺癌的治療方法主要包括手術(shù)、放療、化療、分子靶向治療及生物治療等，但存在副作用大，易耐藥，療效不理想等問題。中醫(yī)藥作為我國傳統(tǒng)且獨有的方法，在防治肺癌上有獨特的效果。益氣除痰方已經(jīng)過前期研究及長期的臨床實踐證明，能有效地抑制肺癌細胞生長及抑制肺癌的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移。

2、>　　目的：本研究通過應(yīng)用益氣除痰方( Yiqi Chutan formula，YQCTF)干預(yù)，以人類肺癌細胞A549為靶細胞，結(jié)合BALB/c裸小鼠實驗，測量并計算肺癌A549裸鼠移植瘤體積、瘤重、抑瘤率，檢測移植瘤激活轉(zhuǎn)錄因子6（activating transcription factor6，ATF6）、調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白1（X-box binding protein1，XBP1）、鈣聯(lián)蛋白（calnexin， CNX）的

3、表達情況，從調(diào)控內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑的角度研究其抗癌的具體機制。
　　方法：在BALB/c裸鼠背側(cè)皮下接種處于對數(shù)生長期的A549細胞懸液（1×107/mL），0.2mL/只。隨機分為模型組（生理鹽水0.2mL）、順鉑注射液組（0.002g·kg-1）、益氣除痰方低劑量組（3.0 g·kg-1）、益氣除痰方高劑量組（6.0 g·kg-1）、聯(lián)合用藥組（6.0 g·kg-1/0.002g·kg-1），每組8只。接種第8天，給予中藥灌胃，每

4、天1次，1次0.2mL，連用14天。第17天，順鉑注射液組及聯(lián)合用藥組給予順鉑注射液腹腔注射，每天1次，1次0.2mL，連用5天。在第22天，麻醉后處死裸鼠，稱取瘤重，測量瘤體大小。采用免疫組織化學(xué)法、免疫印跡法（Western blot）及實時熒光定量多聚核苷酸鏈式反應(yīng)（ quantitative real-time PCR， qRT-PCR）法檢測各組移植瘤組織ATF6、XBP1及CNX的表達。
　　結(jié)果：與模型組比較，除益氣

5、除痰方低劑量組外，各組移植瘤體積、瘤重、ATF6、XBP1、CNX mRNA表達、蛋白表達及平均吸光度均明顯降低（P＜0.01）。聯(lián)合用藥組瘤重及瘤體積低于順鉑注射液組（P＜0.05，P＜0.01）。聯(lián)合用藥組ATF6、XBP1及CNX的平均吸光度較順鉑注射液組降低（P＜0.05，P＜0.01）。聯(lián)合用藥組 ATF6、XBP1、CNX蛋白及mRNA的表達低于順鉑注射液組（P＜0.01）。
　　結(jié)論：益氣除痰方能夠抑制肺癌A549裸