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文檔簡介
1、 中圖分類號:R743 單位代碼:10660 UDC:616.8 學(xué)號:10660S130261 學(xué)科專業(yè)代碼:1002100203 密級:公開 貴 州 醫(yī) 科 大 學(xué) 2016 屆
2、碩 士 學(xué) 位 論 文 (專業(yè)學(xué)位) 重組腺病毒 重組腺病毒 HIF HIF-1α基因 α基因?qū)Υ笫缶衷钚阅X缺血再 對大鼠局灶性腦缺血再灌注 灌注損傷后 損傷后半胱氨酸 半胱氨酸蛋白酶 蛋白酶 3 和熱休克蛋白 和熱休克蛋白 90 90 表達的 表達的影響 影響 The Effects of Recombinant Adenovirus HIF - 1α Gene on the expression of Caspase-3 and H
3、sp 90 after Cerebral Ischemia-reperfusion in Rats 論文作者:惠志蓉 指導(dǎo)教師:陶陶教授/主任醫(yī)師 申請學(xué)位:臨床醫(yī)學(xué)碩士專業(yè)學(xué)位 培養(yǎng)單位:臨床醫(yī)學(xué)院 學(xué)科專業(yè):老年醫(yī)學(xué) 研究方向:腦血管病方向 研究起止日期:2013年9月至2016年6月 論文評閱人: 王傳森 教授/主任醫(yī)師 劉芳 教授/主任醫(yī)師 答辯委員會主席:楊蕊琳 教授/主任醫(yī)師 論文答辯日期:2016年5月18日
4、 二〇一六年五月 重組腺病毒 重組腺病毒 HIF HIF-1α基因 α基因?qū)Υ笫缶衷钚阅X缺血再灌注損傷后 對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷后半胱氨酸 半胱氨酸蛋白酶 蛋白酶 3 和熱休克蛋白 和熱休克蛋白 90 90 表達的 表達的影響 影響 專業(yè):老年醫(yī)學(xué) 碩士研究生:惠志蓉 導(dǎo)師:陶陶 教授 【摘要】 【摘要】 目的: 目的:通過觀察重組腺病毒缺氧誘導(dǎo)因子-1α(Recombinant adenovirus Con
5、taining Hypoxia-inducible Factor1α gene, AdHIF-1α)對大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷后半胱氨酸蛋白酶3和熱休克蛋白90基因表達的影響,以探討重組腺病毒缺氧誘導(dǎo)因子-1α的腦保護作用及可能的機制。 方法 方法: 1) 將健康雄性,6月齡,體重為200-250g的SD大鼠隨機分為以下五組:正常對照組(Normal) ,假手術(shù)組(Sham) ,局灶性腦缺血再灌注損傷組(CIR) ,重組腺病毒空載體組
6、(Ad) ,重組腺病毒HIF-1α干預(yù)組(AdHIF-1α)。根據(jù)再灌注時間,將各組分為4個亞組,即:6h,24h,48h,72h組。2)本實驗用改良的Koizumi線栓法制備大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷2h模型, 通過腦部立體定位儀從大鼠側(cè)腦室分組進行注射, 假手術(shù)組 (Sham) 和局灶性腦缺血再灌注損傷組 (CIR) 組注射生理鹽水,重組腺病空載體組(Ad)組注射重組腺病毒空載體(Ad) ,重組腺病毒AdHIF-1α干預(yù)組(AdHI
7、F-1α)注射重組腺病毒HIF-1α(AdHIF-1α) 。3)大鼠腦缺血模型建立成功后, 行腦組織冰凍切片證實基因注射進入側(cè)腦室內(nèi), 按各亞組時間點進行腦缺血神經(jīng)功能缺失體征評分,行TTC染色測腦梗死體積,測腦組織含水量,HE染色觀察腦組織的病理學(xué)形態(tài)改變: 聚合酶鏈式反應(yīng)技術(shù)及實時熒光定量多聚核苷酸鏈式反應(yīng)技術(shù)檢測大鼠腦中半胱氨酸蛋白酶3mRNA和熱休克蛋白90mRNA表達水平。結(jié)果: 結(jié)果:1)與CIR組、Ad組比較,AdHIF-
8、1α在6h、24h、48h組大鼠神經(jīng)功能缺失體征評分無明顯統(tǒng)計學(xué)差異,但72h組大鼠神經(jīng)功能缺失體征評分降低,有統(tǒng)計學(xué)差異(均P<0.05) 。2)TTC染色后,AdHIF-1α干預(yù)組分別與CIR組、Ad組比較,大鼠腦梗死體積百分比明顯縮小,且均有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(均P<0.01) 。 3) 隨著再灌注時間延長, 各模型組大鼠腦水含量逐漸增加, 在24h-48h時間段腦水含量增長速度最快。AdHIF-1α干預(yù)組于24h,48h
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