養(yǎng)精膠囊對小鼠Leydig細(xì)胞凋亡的影響及機(jī)制研究.pdf

1、[目的]：研究養(yǎng)精膠囊對小鼠Leydig細(xì)胞凋亡的影響，及其作用機(jī)制。
　　[方法]：將小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞系MLTC-1作為實(shí)驗(yàn)對象。在細(xì)胞生長至60％～70％豐度時(shí)，加入相應(yīng)濃度無血清養(yǎng)精膠囊液(YC)繼續(xù)培養(yǎng)。用MTT法測細(xì)胞細(xì)胞增殖狀況，用流式細(xì)胞儀測細(xì)胞的凋亡率。將StAR的小干擾片段(siRNA)和空載小干擾片段(NC）轉(zhuǎn)染至MLTC-1細(xì)胞系，加入1mg/mL養(yǎng)精膠囊液后培養(yǎng)36h，收集細(xì)胞，檢測StAR、Bax、Cas

2、epase-3及Bcl-2核酸和蛋白表達(dá)量。在細(xì)胞處于對數(shù)生長期時(shí)，轉(zhuǎn)染含StAR啟動(dòng)子序列質(zhì)粒DNA，加入1 mg/mL養(yǎng)精膠囊并培養(yǎng)6h后，行雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)來檢測StAR基因啟動(dòng)子活性。細(xì)胞生長至60％～70％時(shí)，加入不同濃度養(yǎng)精膠囊培養(yǎng)液，培養(yǎng)36h后，行細(xì)胞免疫熒光實(shí)驗(yàn)，觀察StAR細(xì)胞內(nèi)定位情況。
　　[結(jié)果]：養(yǎng)精膠囊提取物可明顯改善MLTC-1細(xì)胞增殖狀況，并減少細(xì)胞凋亡。養(yǎng)精膠囊可明顯增加StAR的含量，增