Pseudomonas putida Idaho有機(jī)溶劑耐受機(jī)理的研究.pdf

1、山東大學(xué)碩士學(xué)位論文PseudomonasputidaIdaho有機(jī)溶劑耐受機(jī)理的研究姓名：劉雯雯申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：微生物學(xué)指導(dǎo)教師：許平20090525山東大學(xué)碩士學(xué)位論文溶劑存在的情況下，對(duì)有機(jī)溶劑的耐受能力沒(méi)有提高。說(shuō)明甘油磷酸?；D(zhuǎn)移酶對(duì)菌體的有機(jī)溶劑耐受能力沒(méi)有促進(jìn)作用。2研究PputidaIdaho中磷脂合成途徑中的幾個(gè)關(guān)鍵酶在有機(jī)溶劑壓力下的表達(dá)變化。利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)(qPCR)以及OnestepRTqPC

2、R的方法，從轉(zhuǎn)錄水平對(duì)其進(jìn)行定量分析研究。發(fā)現(xiàn)在不同濃度有機(jī)溶劑存在的情況下，各基因在轉(zhuǎn)錄水平上基本保持不變，從而進(jìn)一步確定戶putidaIdaho在有機(jī)溶劑存在時(shí)，細(xì)胞膜的合成速度并沒(méi)有提高，該菌對(duì)有機(jī)溶劑的耐受能力并不是由細(xì)胞膜的合成速度變快決定的。3采用雙向電泳的方法分析了PputidaIdaho在有機(jī)溶劑壓力下的蛋白表達(dá)變化。對(duì)PputidaIdaho樣品制備方法進(jìn)行了優(yōu)化，確定了用于雙向電泳的PputidaIdaho樣品的制備

3、方法，并實(shí)現(xiàn)了樣品制備的可重復(fù)性，以及雙向電泳實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性。實(shí)驗(yàn)證實(shí)該樣品制備方法還可用于惡臭假單胞菌中其它菌株的雙向電泳樣品制備。通過(guò)對(duì)雙向電泳蛋白質(zhì)圖的軟件分析，發(fā)現(xiàn)了該菌株在有機(jī)溶劑存在和不存在的條件下蛋白表達(dá)的差異。4利用PDQuest軟件對(duì)雙向電泳圖進(jìn)行分析比較，獲得了表達(dá)發(fā)生變化的蛋白的相關(guān)數(shù)據(jù)，利用MOLDITOF質(zhì)譜儀對(duì)差異表達(dá)的蛋白進(jìn)行鑒定，確定了這些蛋白的相關(guān)信息，并按照功能進(jìn)行了分類(lèi)。通過(guò)對(duì)有機(jī)溶劑壓力下這些蛋白