RvD1通過影響小膠質(zhì)細胞極化減輕大鼠2型DNP的機制研究.pdf

1、目的:探討RvD1對2型糖尿病大鼠脊髓背角小膠質(zhì)細胞極化的影響，及其是否可以通過影響小膠質(zhì)細胞極化緩解大鼠2型糖尿病神經(jīng)病理性疼痛。
　　方法:雄性SD大鼠給予高脂高糖飼養(yǎng)8周后出現(xiàn)胰島素抵抗，腹腔注射35mg/kg鏈脲佐菌素(STZ)，3天后血糖＞16.7 mmol/1的大鼠為2型糖尿病大鼠，注射STZ前和注射STZ14天后測機械縮足閾值(MWT)和熱縮足潛伏期(TWL)，14天后測得的MWT、TWL值低于注射前即基礎值的80％

2、以下者為2型糖尿病神經(jīng)病理性痛大鼠。采用隨機法，將2型糖尿病神經(jīng)病理性痛大鼠分為3組(n=36):2型糖尿病神經(jīng)病理性痛組（D組）、2型糖尿病神經(jīng)病理性痛復合RvD1組（R組）、2型糖尿病神經(jīng)病理性痛復合溶劑組（S組）。R、S組大鼠于注射STZ14天后行蛛網(wǎng)膜下腔置管，3天后R、S組分別蛛網(wǎng)膜下腔給予RvD1和無水乙醇溶劑，每天一次，連續(xù)14天，D組大鼠不做任何處理。另取36只正常大鼠為正常對照組（N組），普通飼料飼養(yǎng)。分別在蛛網(wǎng)膜下腔

3、給藥后第1、3、7和14天，各組隨機選取9只大鼠測定MWT和TWL，并取大鼠L4-6脊髓膨大，免疫印跡實驗檢測小膠質(zhì)細胞M1型和M2型極化的標記物，即iNOS和Arg1的表達情況;免疫熒光雙染實驗檢測脊髓背角iNOS和Arg1在脊髓背角小膠質(zhì)細胞的表達情況。
　　結果:
　　1.血糖、胰島素敏感指數(shù)情況:與N組比較，D組大鼠飼養(yǎng)8周后血糖升高，但沒有達到糖尿病的診斷標準-血糖＞16.7mmol/L(N組:4.16±0.41m

4、mol/1，D組:4.70±0.86mmol/l)，而空腹胰島素濃度明顯升高（N組:4.14±1.07mmol/1，D組:25.28±1.70mmol/1，P＜0.05）。飼養(yǎng)8周后，空腹胰島素濃度明顯升高（N組:6.70±1.41mIU/1，D組:12.76±3.77mIU/l，P＜0.05），胰島素敏感指數(shù)明顯下降(N組:-1.40±0.33,D組:-2.25±0.47,P＜0.05)。
　　2.機械痛閾和熱痛閾(MWT、TW

5、L)變化:腹腔注射STZ之前，各組大鼠MWT、TWL差異無統(tǒng)計學意義。腹腔注射STZ后第14天，與N組相比，D、R、S組MWT降低、TWL縮短(P＜0.05)。蛛網(wǎng)膜下腔給藥后第1、3、7、14天，與N組相比，D、S組MWT值降低，TWL值縮短（P＜0.05）;與D組相比，R組在給藥第7、14天后MWT升高、TWL延長，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05）;S組差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。
　　3.脊髓iNOS、Arg1免疫印跡

6、結果:與N組比較，D組和S組在蛛網(wǎng)膜下腔給藥后第1、3、7和14天脊髓iNOS表達增加，Arg1表達減少(P＜0.05);與D組比較，R組在蛛網(wǎng)膜下腔給藥后第7和14天時脊髓iNOS表達減少，Arg1表達增加(P＜0.05);在蛛網(wǎng)膜下腔給藥后第1、3、7和14天時，D組與S組各指標比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。
　　4.脊髓背角iNOS及其與小膠質(zhì)細胞免疫熒光共染結果:iNOS主要與小膠質(zhì)細胞共染，與N組比較，D組和S組

7、在蛛網(wǎng)膜下腔給藥后第1、3、7和14天脊髓背角iNOS表達明顯增加（P＜0.05）;與D組比較，R組在蛛網(wǎng)膜下腔給藥后第7和14天脊髓背角iNOS表達明顯減少(P＜0.05);D組與S組比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05）。
　　結論:2型糖尿病神經(jīng)病理性疼痛大鼠機械痛閾和熱敏痛閾減低，脊髓背角小膠質(zhì)細胞M1型極化增加，M2型極化減少;RvD1的應用使2型糖尿病大鼠痛閾提高，脊髓背角小膠質(zhì)細胞M1型極化下調(diào)，M2型極化上調(diào)。RvD