APOBEC3B基因在乙肝相關性肝癌中的功能研究.pdf

1、肝細胞癌是肝臟原發(fā)性惡性腫瘤，主要發(fā)生于原發(fā)性肝細胞損傷和肝硬化患者中，是全球范圍內(nèi)的最主要的癌癥之一，由于乙型肝炎病毒(HBV)感染的流行，肝細胞癌在我國的形勢尤為嚴峻。
　　A3B是七種APOBEC3脫氨酶家族中的一員，它負責針對多種DNA病毒的先天性免疫應答以及適應性免疫應答，所有這類酶均表現(xiàn)出DNA脫氨酶活性。近期研究證據(jù)提示APOBEC3B(A3B)作為一種DNA酶，是乳腺癌，宮頸癌、膀胱癌等多種癌癥中出現(xiàn)基因突變的原因

2、之一。例如，最近的研究顯示在大多數(shù)乳腺癌細胞系中A3B的表達水平普遍升高，且更具活性，并且提示A3B在乳腺癌組織中表達水平的升高與C-T突變的增加以及堿基替換具有明確關聯(lián)。更引人注目的是，轉(zhuǎn)基因小鼠或兔在肝組織中的APOBEC1高表達可誘導肝臟腫瘤形成和細胞轉(zhuǎn)化，提示胞苷脫氨酶家族與肝癌的發(fā)生之間存在著某種關聯(lián)，但其機制并未闡明。近期研究顯示，A3B在肝癌中的高表達與腫瘤衛(wèi)星灶的形成、血管侵犯、周圍肝組織的侵襲以及更高的腫瘤分期顯著相關

3、，但其機制仍需進一步研究。
　　目的:
　　旨在揭示A3B在人類乙肝相關性肝細胞癌(HBV-HCC)中的功能。
　　方法：
　　我們回顧性分析了205例在2005-2015年期間單中心行肝葉切除術的HBV-HCC患者，所有患者診斷均經(jīng)病理組織學證實，患者隨訪記錄包括臨床病理指標、無復發(fā)生存期(RFS)以及總生存期(OS)。通過免疫組織化學染色半定量分析腫瘤組織及癌旁肝組織中的A3B蛋白表達水平。A3B表達水平的臨

4、床病理變量之間的相關顯著性使用Logistic回歸分析和卡方檢驗進行驗證?；颊呱媲€通過Kaplan-Meier進行檢驗。使用Cox回歸模型進行擬合，以分析預后因素對RFS的影響。
　　結果:
　　在肝癌組織及癌旁組織中均可見A3B蛋白的表達，且癌組織中的表達水平顯著高于癌旁組織(p=0.004)。臨床病理分析表明，A3B表達水平與腫瘤大小(p=0.038)以及腫瘤的T分期(p=0.010)顯著相關。A3B的表達水平與總生

5、存率(p=0.788)以及無復發(fā)生存率(p=0.341)無明顯相關性。
　　此外，我們還通過qPCR測定了不同肝細胞癌細胞系中的A3B的表達，顯示在不同肝細胞癌細胞系中呈現(xiàn)出不同的A3B表達水平。另外，在體外實驗中，我們使用A3B全長質(zhì)粒瞬時轉(zhuǎn)染肝癌細胞株，檢測A3B過表后肝癌細胞生長以及遷移能力。結果顯示，相對于瞬時轉(zhuǎn)染空載的肝癌細胞相比，在瞬時轉(zhuǎn)染A3B全長質(zhì)粒的肝癌細胞中顯示出更強的增殖能力以及遷移能力。
　　結論：<