MicroRNA-328a對PTZ致癇大鼠記憶功能影響的研究.pdf

1、目的：癲癇患者認知功能損害的產(chǎn)生機制一直備受關(guān)注。前期研究提示存在記憶功能障礙的PTZ(pentylenetetrazole，戊四氮)致癇大鼠腦中海馬組織所表達的miR-328a明顯下調(diào)，但miR-328a的下調(diào)是否為癲癇大鼠產(chǎn)生記憶功能障礙的原因，以及其發(fā)生作用的潛在機制尚不明確。本實驗通過以下設計驗證miR-328a在PTZ致癇大鼠海馬組織中的表達變化，研究其與癲癇大鼠記憶障礙產(chǎn)生的可能關(guān)系及其潛在機制。
　　方法：48只成年

2、雄性SD大鼠隨機均分為4組:正常對照組、PTZ對照組、miR-328a抑制組、抑制劑對照組。各組大鼠除特殊干預外，其他生存條件均相同。飼養(yǎng)28天后分別進行Morris水迷宮實驗比較各組大鼠學習、記憶功能，并在完成后提取海馬組織，行RT-qPCR檢測miR-328a表達量，Targetscan預測潛在靶基因，Western Blotting檢測其潛在下游靶蛋白表達差異。
　　結(jié)果：
　　(1) Morris水迷宮:①前5日各組

3、大鼠逃避潛伏期均逐日下降。②第5日逃避潛伏期:PTZ對照組較正常對照組延長(P＜0.05);PTZ對照組與抑制劑對照組之間無統(tǒng)計學差異(P＞0.05);miR-328a抑制組較抑制劑對照組延長(P＜0.05)。③第6日目標象限累計時間:PTZ對照組較正常對照組減少(P＜0.05);PTZ對照組與抑制劑對照組之間無統(tǒng)計學差異(P＞0.05);miR-328a抑制組較抑制劑對照組減少(P＜0.05)。④第6日目標象限累計距離:PTZ對照組較

4、正常對照組減少(P＜0.05);PTZ對照組與抑制劑對照組之間無統(tǒng)計學差異(P＞0.05);miR-328a抑制組較抑制劑對照組減少(P＜0.05)。
　　(2) RT-qPCR示各組大鼠海馬miR-328a表達量:PTZ對照組較正常對照組減少(P＜0.05);PTZ對照組與抑制劑對照組之間無統(tǒng)計學差異(P＞0.05);miR-328a抑制組較抑制劑對照組減少(P＜0.05)。
　　(3) Targetscan: miR-3

5、28a在BACE1 mRNA的3'非編碼區(qū)408-415 nt存在互補區(qū)。
　　(4) Western Blotting示各組大鼠海馬BACE表達量:PTZ對照組較正常對照組增多(P＜0.05);PTZ對照組與抑制劑對照組之間無統(tǒng)計學差異(P＞0.05);miR-328a抑制組較抑制劑對照組減少(P＜0.05)。其中PTZ對照組BACE表達量較正常對照組增高0.65倍;miR-328a抑制組較抑制劑對照組BACE表達量增高0.38