VMAT2基因聯(lián)合環(huán)境毒素對帕金森病非運動癥狀的作用研究.pdf

1、目的:本實驗通過分別檢測正常對照（WT）組、WT+魚藤酮（Rotenone, Rot）組、Rot+VMAT2（+/-）組、VMAT2（+/-）組共四組C57BL/6小鼠糖水偏好試驗、懸尾實驗等行為學改變，以及利用HPLC法檢測腦組織內DA、5-HT、NE、DOPAC、HVA等神經遞質濃度變化，探討VMAT2基因對帕金森病小鼠腦紋狀體內單胺類神經遞質及非運動癥狀的影響，進一步研究VMAT2基因聯(lián)合環(huán)境毒素對帕金森病非運動癥狀發(fā)揮作用的機制

2、。
　　方法:選取12月齡左右的C57BL/6雄性小鼠做為試驗對象分為四組，第一組選取野生型（Wildtype, WT）C57BL/6小鼠作為正常對照組；第二組選用WT小鼠并用魚藤酮連續(xù)灌胃4個月制備PD動物模型組；第三組使用出生時即敲低VMAT2基因50％的C57BL/6小鼠組；第四組選取VMAT2基因50%敲低小鼠使用連續(xù)魚藤酮灌胃處理4個月后的造模組。造模成功后，對各組小鼠進行檢測抑郁程度的糖水偏好試驗及懸尾實驗。行為學實驗

3、結束后將各組動物處死并快速取出腦組織，將取得的腦組織標本處理后用高效液相色譜法(HPLC)分別測定腦組織中DA、DOPAC、HVA、5-HT、NE含量，并計算各組小鼠腦組織中DOPAC/DA比值的變化。應用統(tǒng)計學方法分析各組小鼠行為學及神經遞質含量各組之間的差異變化。
　　結果:糖水偏好實驗：WT+Rot組、VMAT2（+/-）組、VMAT2（+/-）+Rot組糖水偏好度與WT組相比均有所降低，VMAT2（+/-）+Rot組糖水偏

4、好度與VMAT2（+/-）組相比也有所降低，差異均具有統(tǒng)計學意義（p<0.05）。
　　懸尾實驗：WT+Rot組、VMAT2（+/-）組、VMAT2（+/-）+Rot組懸尾不動時間與WT組相比顯著延長，VMAT2（+/-）+Rot組懸尾不動時間與VMAT2（+/-）組相比也有所降低，差異均具有統(tǒng)計學意義（p<0.05）。
　　HPLC:VMAT2（+/-）+Rot組、VMAT2（+/-）組、WT+Rot組相比于WT組，DA、

5、5-HT、NE含量均明顯降低，差異具有統(tǒng)計學意義（p<0.05）。VMAT2（+/-）+Rot組相比于VMAT2（+/-）組，DA、5-HT、NE含量亦明顯降低，差異具有統(tǒng)計學意義（p<0.05）。
　　結論:1.魚藤酮造模PD組小鼠出現(xiàn)抑郁的癥狀，行為學及病理生理學均有明顯改變；提示：一定情況下，魚藤酮不僅能模擬帕金森病的運動癥狀，且能反應非運動癥狀的變化。VMAT2基因敲低小鼠亦出現(xiàn)明顯抑郁的行為學及病理生理變化，說明VMAT