液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)在食品和藥物安全控制中的應(yīng)用.pdf

1、液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法(HPLC—MS—MS)將色譜的高分離性能和質(zhì)譜的高鑒別特點(diǎn)相結(jié)合，組成了較完美的現(xiàn)代分析技術(shù)，成為食品和藥物安全檢測(cè)中的重要手段。
　　 自2002年瑞典科學(xué)家報(bào)道油炸或焙烤的淀粉類食品中發(fā)現(xiàn)較高含量的潛在致癌物丙烯酰胺以來(lái)，食品中丙烯酰胺對(duì)健康的危害受到了世界范圍的廣泛關(guān)注。研究表明食品中丙烯酰胺主要是由游離氨基酸特別是天門(mén)冬酰胺與還原性糖類通過(guò)Maillard反應(yīng)生成的。經(jīng)高溫處理的高淀粉食品中廣泛存在

2、較高水平的丙烯酰胺，而很多中草藥來(lái)源于植物的根莖和果實(shí)，其中淀粉含量較高，有的還需要經(jīng)過(guò)高溫炮制才能使用，高溫炮制的藥材中是否含有丙烯酰胺是我們急需回答的一個(gè)科學(xué)問(wèn)題。這項(xiàng)研究對(duì)于我國(guó)這樣一個(gè)中藥生產(chǎn)和使用大國(guó)，無(wú)論是從探索中藥的作用機(jī)理、用藥安全來(lái)講，還是從破解可能的技術(shù)壁壘，增強(qiáng)中藥出口競(jìng)爭(zhēng)力來(lái)講，都具有重要的意義。
　　 大環(huán)內(nèi)酯類抗生素是一類化學(xué)結(jié)構(gòu)和抗菌作用相近的堿性抗生素群，這類藥物的不良反應(yīng)主要是導(dǎo)致茶堿血濃度升高

3、而致中毒，嚴(yán)重者造成肝腎的嚴(yán)重?fù)p害，甚至死亡。因此人們對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的分析研究日益關(guān)注，而且許多國(guó)家已經(jīng)對(duì)我國(guó)出口的蜂產(chǎn)品中大環(huán)內(nèi)酯類藥物設(shè)定了相應(yīng)的限量要求，要求每種藥物的殘留量不得超過(guò)lOμg/kg。
　　 本論文將液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法應(yīng)用于高溫炮制藥材中丙烯酰胺和蜂蜜中大環(huán)內(nèi)酯類藥物殘留的檢測(cè)，建立了穩(wěn)定、靈敏、抗干擾的檢測(cè)方法，并對(duì)影響高溫炮制藥材中丙烯酰胺生成量的因素進(jìn)行了研究。全文共分4章：
　　 第l章

4、在參考100篇文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上綜述了丙烯酰胺的檢測(cè)方法以及影響丙烯酰胺生成的諸多因素，并總結(jié)了大環(huán)內(nèi)酯類藥物殘留的各種重要分析手段。
　　 第2章建立了液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定高溫炮制藥材中丙烯酰胺含量的方法。樣品的水提液經(jīng)Oasis HLB和Bond Elute LRC—PRS固相萃取柱凈化后進(jìn)樣分析。電噴霧正離子MRM模式檢測(cè)，內(nèi)標(biāo)法定量：丙烯酰胺m/z72＞55，氘代丙烯酰胺m/z75＞58。本方法中丙烯酰胺在2.0～1000

5、.0ng/ml濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)大于0.9997。方法檢出限為0.8μg/kg(S/N=3)，高中低三個(gè)水平的回收率在99.3％～100.9％之間(n=3)，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在3.7％以下。用本文所建立的方法分別測(cè)定了生麥芽、炒麥芽、焦麥芽、生山藥、炒山藥、生白芍、炒白芍中丙烯酰胺的含量。結(jié)果表明：生麥芽、生山藥和生白芍中不含丙烯酰胺，而炒麥芽、焦麥芽、炒山藥、炒白芍中檢測(cè)到了丙烯酰胺，質(zhì)量濃度范圍在25.8～1286μg/k

6、g之間。
　　 第3章考察了加熱溫度對(duì)炮制麥芽、谷芽中丙烯酰胺生成量和含糖量的影響。發(fā)現(xiàn)溫度是影響丙烯酰胺生成的重要因素。在120～200℃之間，隨著加熱溫度的逐漸升高，谷芽中丙烯酰胺的含量也在逐漸增加。而對(duì)于麥芽來(lái)說(shuō)，當(dāng)溫度從120℃上升到160℃，丙烯酰胺的含量也在逐漸增加并達(dá)最高值，繼續(xù)升高溫度則丙烯酰胺的含量逐漸降低。
　　 第4章以羅紅霉素為內(nèi)標(biāo)，建立了LC—MS—MS檢測(cè)九種大環(huán)內(nèi)酯類抗生素殘留的新方法。考察