甲硫氨酸腦啡肽對小鼠EAE的治療作用及其對中樞神經系統(tǒng)內小膠質細胞M1型極化的影響.pdf

1、目的:
　　觀察甲硫氨酸腦啡肽(MENK)對實驗性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)小鼠模型的治療作用以及對中樞小膠質細胞M1型極化的影響。
　　研究方法:
　　將小鼠分為EAE組、EAE-PBS組和EAE-MENK組。采用MOG33-35、佐劑CFA、百日咳毒素免疫動物建立EAE模型，EAE-MENK組和EAE-PBS組每日腹腔注射10mg/(kg·d)MENK或等量PBS。自小鼠發(fā)病之日起至發(fā)病第8天（發(fā)病高峰期結束），

2、每日記錄小鼠的體重以及臨床評分變化。于發(fā)病高峰期頸椎脫位法處死小鼠，多聚甲醛心臟灌注固定，取大腦與脊髓，制作脊髓與腦石蠟切片，行大腦HE染色及LFB髓鞘染色。發(fā)病高峰期提取小鼠腦單核細胞流式細胞儀檢測小膠質細胞M1型極化情況。
　　結果:
　　1.MENK的治療作用:小鼠臨床評分變化: EAE組發(fā)病高峰期臨床評分3.8±0.9，EAE-PBS組發(fā)病高峰期臨床評分3.8±1.0，EAE-MENK組發(fā)病高峰期臨床評分1.4±0.

3、4。EAE-MENK組與其他兩組比較，高峰期臨床評分分別降低了2.6±0.1(P＜0.05)和2.6±0.3(P＜0.05)，EAE組與EAE-PBS組比較，高峰期臨床評分無明顯差異。小鼠體重變化:與EAE-MENK組相比，EAE組發(fā)病高峰期體重下降2.3±0.5g(P＜0.05), EAE-PBS組發(fā)病高峰期體重下降2.2±0.6g(P＜0.05)。EAE組與EAE-PBS組小鼠體重變化幅度大，發(fā)病初期至中期體重下降明顯，EAE-ME

4、NK組小鼠與這兩組相比，體重平穩(wěn)上升，未出現大幅波動。病理結果:HE染色發(fā)現EAE組與EAE-PBS組小鼠大腦實質炎性細胞浸潤明顯。EAE-MENK組小鼠大腦實質中炎性細胞浸潤顯著減輕。脊髓LFB髓鞘染色EAE組與EAE-PBS組可見脊髓白質疏松，髓鞘不連續(xù)，有大小不等的片狀脫髓鞘區(qū)。EAE-MENK組脊髓髓鞘脫失不明顯。
　　2.MENK對M1型小膠質細胞極化比例的影響:流式細胞學檢測結果表明，與EAE組及EAE-PBS組相比，

5、EAE-MENK組CD40陽性M1型小膠質細胞比例分別下降百分之15.13±0.61(P＜0.05)和百分之15.13±0.83(P＜0.05)，CD11c陽性M1型小膠質細胞比例分別下降百分之8.03±0.47(P＜0.05)和百分之7.43±1.89(P＜0.05)。由此可見，與EAE組和EAE-PBS組比較，EAE-MENK組中CD40與CD11c標記的M1型小膠質細胞的比例均明顯減少。
　　結論:
　　MENK可明顯