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文檔簡介
1、目的:
觀察足細胞Tbxa2r基因敲低對嘌呤霉素氨基核苷誘導的足細胞凋亡的影響。
方法:
通過目標序列的設(shè)計以及細胞轉(zhuǎn)染效率評價后,RT-PCR檢測干擾效果,Westernblot法檢測Tbxa2r蛋白表達,流式細胞儀檢測嘌呤霉素氨基核苷誘導的MPC5細胞的凋亡情況。
結(jié)果:
1.正常足細胞培養(yǎng)48h后,用嘌呤霉素氨基核苷刺激48h,細胞沒有明顯的凋亡現(xiàn)象。
2、 2.陰性對照組(加無關(guān)siRNA片段),嘌呤霉素氨基核苷刺激后,結(jié)果也和正常細胞相仿。
3.陽性對照組(GAPDH干擾質(zhì)粒),嘌呤霉素氨基核苷刺激后,凋亡細胞明顯增加,壞死細胞也大大增加。
4.有效干擾片段組(Tbxa2r-mus-1677),嘌呤霉素氨基核苷刺激后,凋亡和壞死的細胞和陽性對照組相似。
結(jié)論:
嘌呤霉素氨基核苷能促進Tbxa2r基因敲低的足細胞發(fā)生凋亡和壞死。
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