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文檔簡介
1、目的：
研究機械牽拉人支氣管上皮樣（16HBE）細胞對轉化生長因子-β1（TGF-β1）、成纖維細胞生長因子-2（FGF-2）表達的影響及其相關信號轉導機制。
方法：
采用Flexcell-4000細胞柔性基底加載裝置牽拉16HBE細胞，牽拉應力為15%，頻率為1Hz，加載時間分別為：0.5h、1h、1.5h、2h。選擇TGF-β1、FGF-2和Ca2+相對表達較高的一組以經(jīng)典瞬時感受器電位1（TRPC1）
2、抑制劑SKF96365、蛋白激酶C（PKC）抑制劑HA-100作為干預因素。將細胞分為不予以機械牽拉的空白對照組、機械牽拉組、機械牽拉+SKF96365組、機械牽拉+HA-100組。應用Western檢測TGF-β1、FGF-2蛋白的表達，實時熒光定量PCR檢測TGF-β1、FGF-2 mRNA的表達，流式細胞術檢測細胞內Ca2+熒光強度。
結果：
16HBE細胞在15%牽拉應力作用下，與對照組相比，4個時間點的TG
3、F-β1蛋白和mRNA、FGF-2蛋白和mRNA、胞內Ca2+熒光強度均顯著升高（P＜0.05），作用0.5h時其增幅最大，作用1h出現(xiàn)降低，1.5h、2h表達量又逐漸升高。對0.5h機械牽拉組予以SKF96365、HA-100干預后，其TGF-β1、FGF-2 mRNA和蛋白的表達，以及Ca2+內流均較單純牽拉組降低（P＜0.05）。
結論：
機械牽拉可導致16HBE細胞氣道重塑相關因子表達增加，其信號通路可能與機
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