應用酵母雙雜交和酵母三雜交系統(tǒng)研究G蛋白信號傳導通路中的相關蛋白因子.pdf

1、G蛋白是一類由Gα、β、γ三亞基組成的異三聚體蛋白,可介導胞外各種刺激（如：激素、生長因子、物化信息等）向胞內傳導,調節(jié)細胞生長,分裂、分化等重要生命活動.活化的Gα亞基（Gα-GTP）和Gβγ亞基二聚體可以作為相對獨立的結構和功能單位引發(fā)不同的信號傳導通路.目前,研究這兩個功能單位下游的新的效應因子及Gβ和Gγ亞基在Gβγ亞基二聚體胞內信號傳導中的作用是研究的熱點問題.為了尋找Gβγ下游的新的蛋白因子及研究Gβ或Gγ亞基在Gβγ亞基二

2、聚體中的作用,以揭示G蛋白信號傳導的新機制,該研究課題運用酵母雙雜交系統(tǒng)和該室構建的酵母三雜交系統(tǒng),分別以Gβ1和Gβ1γ2為餌蛋白篩選入腦cDNA文庫（Gβ1,Gγ2在腦中高表達）,并用免疫共沉淀、細胞免疫熒光共聚焦等技術證實蛋白間的相互作用,另外又用片段刪除實驗定位蛋白分子間相互識別和結合的特異結構域.結果說明：Gβ1亞基作為獨立單位可以與Fascin蛋白結合,參與細胞骨架調控,首次揭示了G蛋白通過Gβ1亞基參與細胞骨架調控的機制;