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文檔簡介
1、研究背景和目的:隨著生物醫(yī)學模式向生理-心理-社會醫(yī)學模式的轉(zhuǎn)變,心理應激在疾病發(fā)生、發(fā)展中的作用越來越受到關(guān)注。人類的交感神經(jīng)系統(tǒng)與心理應激密切相關(guān)。星狀交感神經(jīng)節(jié)(Stellate ganglia,SG)發(fā)出交感神經(jīng)的節(jié)后纖維進入心臟。心肌缺血損傷的傷害信息可通過背根神經(jīng)節(jié)(Dorsal root ganglia, DRG)傳入中樞。神經(jīng)病理變化剌激時,頸部交感神經(jīng)節(jié)(包括星狀神經(jīng)節(jié))、背根神經(jīng)節(jié)嘌呤受體P2X3和P2X7表達上調(diào)。
2、噪音作為應激源可引交感神經(jīng)系統(tǒng)興奮,產(chǎn)生心理應激效應。本研究旨在觀察噪聲剌激對大鼠心交感功能的影響,分析星狀交感神經(jīng)節(jié)P2X7受體和頸部背根神經(jīng)節(jié)P2X3受體的表達水平,以及阻斷P2X7受體和P2X3受體對以上變化的影響,為了解星狀交感神經(jīng)節(jié)P2X7和背根神經(jīng)節(jié)P2X3受體在心理應激機制中的作用提供實驗依據(jù)。
方法:將25只雄性SD大鼠隨機分為5組,每組5只:對照組、音樂組、噪音組、噪音+P2X7拮抗劑( Brilliant
3、blue G, BBG)組、噪音+P2X3拮抗劑(A-317491)組,每天分別給予噪音或音樂相應的處理,連續(xù)7天,然后進行下述檢測分析:
?。?)使用無創(chuàng)血壓計測量各組大鼠的血壓、心率及心率變異性,觀察音樂刺激和噪音刺激、噪音刺激加P2X7受體拮抗和噪音刺激加P2X3受體拮抗對大鼠心交感功能的影響;
?。?)測定并比較各組大鼠的心電圖特點(ST段),觀察音樂刺激和噪音刺激、噪音刺激加P2X7受體拮抗和噪音刺激加P2X3
4、受體拮抗對大鼠心肌供血的影響;
(3)逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(Reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)測定各組大鼠星狀交感神經(jīng)節(jié)P2X7受體和背根神經(jīng)節(jié)P2X3受體的mRNA表達水平,觀察音樂刺激和噪音刺激、噪音刺激加P2X7受體拮抗和噪音刺激加P2X3受體拮抗對大鼠的相關(guān)神經(jīng)節(jié)嘌呤受體轉(zhuǎn)錄的影響;
(4)蛋白印跡(Western Blot)檢測各組
5、大鼠星狀交感神經(jīng)節(jié)P2X7受體和背根神經(jīng)節(jié)P2X3受體的蛋白水平,觀察音樂刺激和噪音刺激、噪音刺激加P2X7受體拮抗和噪音刺激加P2X3受體拮抗對大鼠的相關(guān)神經(jīng)節(jié)嘌呤受體蛋白表達的影響。
結(jié)果
?。?)音樂組大鼠的收縮壓、舒張壓、心率低于對照組(p<0.05),噪音組大鼠的收縮壓、舒張壓、心率及心率變異性高于對照組(p<0.05),噪音+P2X7拮抗劑組和噪音+P2X3拮抗劑組大鼠的收縮壓、舒張壓、心率及心率變性均明顯
6、低于噪音組(p<0.05-0.01);
(2)噪音組大鼠心電圖ST段明顯壓低,噪音+P2X7拮抗劑組、噪音+P2X3拮抗劑組大鼠心電圖ST段壓低現(xiàn)象有明顯改善;
(3)音樂組大鼠背根神經(jīng)節(jié)P2X3受體mRNA表達低于對照組(p<0.05),而噪音組大鼠背根神經(jīng)節(jié)P2X3受體mRNA表達明顯高于對照組(p<0.01);噪音+A-317491組大鼠背根神經(jīng)節(jié) P2X3受體 mRNA表達低于噪音組大鼠(p<0.01)。
7、r> ?。?)音樂組大鼠星狀神經(jīng)節(jié)P2X7受體mRNA表達低于對照組(p<0.05),噪音組大鼠星狀神經(jīng)節(jié)P2X7受體mRNA表達高于對照組(p<0.05),噪音+BBG組大鼠星狀神經(jīng)節(jié)P2X7受體mRNA表達低于噪音組(p<0.05)。
(5)音樂組大鼠的背根神經(jīng)節(jié)P2X3受體蛋白表達低于對照組(p<0.05),噪音組大鼠背根神經(jīng)節(jié)P2X3受體蛋白表達高于對照組(p<0.05),噪音+A-317491組大鼠背根神經(jīng)節(jié)P2X3
8、受體蛋白表達低于噪音組(p<0.01)。
?。?)音樂組大鼠星狀神經(jīng)節(jié)P2X7受體蛋白表達低于對照組(p<0.05),噪音組大鼠星狀神經(jīng)節(jié)P2X7受體蛋白表達高于對照組(p<0.05),噪音+BBG組大鼠星狀神經(jīng)節(jié)P2X7受體蛋白表達低于噪音組(p<0.05)。
結(jié)論:噪音刺激后大鼠血壓升高、心率加快,心率變異性增大,心電圖出現(xiàn)異常變化,背根神經(jīng)節(jié)P2X3受體mRNA、蛋白表達升高,星狀神經(jīng)節(jié)P2X7受體mRNA、蛋白
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