Ang1、Ang2和Tie2在血管內(nèi)皮細(xì)胞和體外三維培養(yǎng)血管樣結(jié)構(gòu)中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的： 構(gòu)建體外血管生成的三維培養(yǎng)模型，研究體內(nèi)臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HVUECs)、體外培養(yǎng)的HVUECs和體外三維培養(yǎng)的血管樣結(jié)構(gòu)中促血管生成素1、2及其受體(Ang1、2及Tie2)的表達(dá)水平，旨在探討其在體外血管生成中的作用，為將來進(jìn)一步在體外進(jìn)行抑制血管生成的實(shí)驗(yàn)研究打下基礎(chǔ)。 方法： 以酶消化法獲得HVUECs，經(jīng)免疫細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù)鑒定，采用夾心培養(yǎng)法構(gòu)建體外血管生成的三維培養(yǎng)模型，獲得三維血管樣結(jié)構(gòu)。采

2、用逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)的方法分別檢測(cè)10例體內(nèi)HVUECs、體外培養(yǎng)的HVUECs及體外三維培養(yǎng)模型的血管樣結(jié)構(gòu)中Angl、Ang2及Tie2信使核糖核酸(mRNA)的表達(dá)水平；同時(shí)采用免疫組化法和免疫細(xì)胞化學(xué)染色法檢測(cè)10例體內(nèi)HVUECs、體外培養(yǎng)的HVUECs中Angl、Ang2及Tie2蛋白的表達(dá)水平。 結(jié)果： 1、以酶消化法可獲得以HVUECs為主的混合細(xì)胞懸液，經(jīng)反復(fù)貼壁法分離純化內(nèi)皮細(xì)胞，

3、采用免疫細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù)對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行鑒定并確定了所純化的細(xì)胞為HVUECs。采用夾心培養(yǎng)法成功構(gòu)建了體外血管生成的三維培養(yǎng)模型，獲得三維血管樣結(jié)構(gòu)。 2、體外三維培養(yǎng)模型中Ang2mRNA、Tie2mRNA表達(dá)水平均高于體內(nèi)外HVUECs組(P<0.05)；體內(nèi)外HVUECs組間Ang2mRNA、Tie2mRNA表達(dá)水平相比差異無顯著性意義(P>0.05)。 3、體內(nèi)外HVUECs及體外三維培養(yǎng)模型中AnglmRNA表