肺衰合劑對慢性阻塞性肺疾病大鼠氣道炎癥及氣道重塑的影響研究.pdf

1、目的：
　　慢性阻塞性肺疾病(Chronic Obstructive Pulmonary Disease,COPD)是一種慢性、多發(fā)的、常見的、以不完全可逆為主要特征的氣流受限性肺部疾患，5年內(nèi)將成為全球第三大死亡因素。普遍認為COPD主要始動因素可能是多種原因刺激而導(dǎo)致的肺組織和氣道內(nèi)的炎癥，而氣道重塑導(dǎo)致的小氣道病理改變包括氣流受限、氣道阻力增加、甚至是氣道閉塞是COPD的重要特征。本研究利用香煙煙霧被動吸收裝置將大鼠暴露在香

2、煙煙霧中，并通過甲狀軟骨穿刺向氣管內(nèi)注射脂多糖誘導(dǎo)建立大鼠COPD的模型基礎(chǔ)上，應(yīng)用中藥復(fù)方肺衰合劑進行干預(yù)，測定不同組大鼠血清中ET-1、BALF中TNF-α、IL-8，肺組織勻漿中SOD的水平；應(yīng)用免疫組化的方法檢測肺組織中MMP-2、MMP-9的蛋白表達，進一步探討肺衰合劑對COPD的療效機制。
　　方法：
　　選用大鼠36只，應(yīng)用統(tǒng)計學(xué)軟件生成隨機數(shù)字表的方法將大鼠隨機分成3個組，包括（空白組對照組、COPD模型組、

3、肺衰治療組），每組12只。借助LPS聯(lián)合香煙煙霧暴露的方法建立COPD疾病大鼠模型。
　　采用HE染色方法從肺組織病理形態(tài)學(xué)方面觀察肺衰合劑對COPD的影響情況。
　　采用酶聯(lián)免疫吸附測定大鼠血清中內(nèi)皮素-1表達水平，支氣管肺泡灌洗液中IL-8、TNF-α水平，肺組織勻漿中超氧歧化物的活性，從而探討肺衰合劑對COPD炎癥細胞因子的影響。
　　采用免疫組化的檢測技術(shù)測定肺組織中MMP-2、MMP-9蛋白表達，并應(yīng)用圖像處

4、理系統(tǒng)測量每個大鼠肺組織切片中小氣道氣道平滑肌層的厚度，觀察蛋白酶與小氣道平滑肌肌層厚度的回歸關(guān)系，研究肺衰合劑對COPD氣道重塑的影響。
　　應(yīng)用SPSS17．0的統(tǒng)計學(xué)軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，當(dāng)P值<0．05時表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。數(shù)據(jù)結(jié)果全部應(yīng)用均數(shù)加減標準差（-χ±s）表示。多組間比較采用計量資料的單因素方差分析，其中組間比較采用LSDt檢驗。當(dāng)不符合單因素方差分析進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計時，應(yīng)用采用非參數(shù)檢驗。
　　結(jié)果：

5、　　組織病理改變：與COPD模型組比較，治療組肺泡結(jié)構(gòu)相對完整，部分肺泡壁變薄，肺泡表面積減少，肺泡壁組織密度減低，肺泡孔擴大，但較模型組肺氣腫形成的囊腔可見變小、各級支氣管炎癥減輕
　　ELISA檢測結(jié)果：COPD大鼠血清內(nèi)皮素、支氣管肺泡灌洗液中TNFα和IL-8三種的水平的兩兩比較顯示：與空白對照組比較，COPD模型組三種炎癥細胞因子表達明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；與模組比較，肺衰合劑治療組三種炎癥細胞因子表

6、達降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。肺組織中SOD表達量三組無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　免疫組化檢測結(jié)果顯示：與空白對照組相比，COPD模型組大鼠肺組織基質(zhì)金屬蛋白酶2（MMP-2）、基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP-9）含量均升高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；與COPD模型組相比，肺衰合劑治療組大鼠肺組織基質(zhì)金屬蛋白酶2（MMP-2）、基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP-9）含量均降低，具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

7、>　　肺組織氣道平滑肌厚度：與空白對照組相比，COPD模型組大鼠小氣道支氣管平滑肌厚度明顯增加，小氣道平均平滑肌厚度差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）；與COPD模型組相比，肺衰合劑治療組大鼠小氣道平滑肌厚度減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。
　　結(jié)論：
　　1、COPD大鼠肺組織結(jié)構(gòu)紊亂，炎癥細胞浸潤增加，肺組織破壞明顯，肺泡壁明顯融合，肺泡腔擴大，小氣道平滑肌層厚度增加；
　　2、COPD大鼠支氣管肺泡灌洗液中

8、IL-8、TNF-α和血漿ET-1的表達明顯增加，從而參與COPD的重要肺內(nèi)和氣道內(nèi)的炎癥過程；而肺組織勻漿SOD水平未見明顯增加；
　　3、COPD大鼠肺實質(zhì)中MMP-2、MMP-9明顯增加，兩者表達水平與氣道重構(gòu)的程度呈正相關(guān)，在COPD氣道重塑中有重要作用；
　　4、肺衰合劑可通過降低支氣管肺泡灌洗液中IL-8、TNF-α和血漿ET-1等炎癥細胞因子水平，從而降低肺組織局部及全身的炎癥反應(yīng)，但對肺勻漿SOD活性無明顯影