溫陽消飲法對胸腔積液模型大鼠腎、空腸組織差異基因表達影響的實驗研究.pdf

1、目的：
　　利用基因芯片技術分析溫陽消飲法調控胸腔積液模型大鼠基因表達的作用機制。
　　方法：
　　40只清潔級Wistar成年大鼠適應性飼養(yǎng)7天后，隨機分為溫陽消飲組（W）、去桂消飲組（Q）、模型對照組（M）、空白對照組（K），每組10只。除空白對照組外，其余3組以1％λ-角叉菜膠胸腔注射建立胸腔積液（類似懸飲）大鼠模型，造模24h后拍X線片對各組大鼠進行病理評價。于造模后2h各組以相應藥物灌胃，每天1次，連續(xù)5天。

2、灌胃結束后大鼠進行安樂死。每組取3只大鼠的腎髓質和空腸組織，采用基因芯片技術進行基因表達譜檢測，篩選出差異表達基因，并進行Pathway分析。
　　結果：
　　1.腎髓質組織基因表達譜檢測
　　溫陽消飲組：溫陽消飲組與模型對照組比較和模型對照組與空白對照組比較共同表達的通路為：神經(jīng)活性配體受體相互作用通路、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、腎素血管緊張素系統(tǒng)，共同表達基因為：LOC317471、Olr462、Mcpt8I3、Olr718

3、、Mcpt8I2、Cd80、Ttn。
　　去桂消飲組：去桂消飲組與模型對照組比較和模型對照組與空白對照組比較共同表達的通路為：神經(jīng)活性配體受體相互作用通路，共同表達的基因為Cep295nl、Mcpt8I3、Fam64a。
　　2.空腸組織基因表達譜檢測
　　溫陽消飲組：溫陽消飲組與模型對照組比較和模型對照組與空白對照組比較共同表達的通路為：藥物代謝細胞色素P450通路、卟啉和葉綠素代謝通路、淀粉和蔗糖代謝通路、甾類激素

4、生物合成通路、嗅覺傳導通路、藥物其他酶代謝通路、細胞色素P450外源性化學物質通路、戊糖和葡萄糖醛酸相互轉換通路、視黃醇代謝通路，共同表達的基因為：Cacnb4、Gpr27、Ugt2b、Spock3、Olr113、Olr1472、Ugt2b7、Opn5、RGD1564865、Ugt2b17、Ugt2b37、Slc5a5、Slc4a9、Ccdc79、Anks1b。
　　去桂消飲組：去桂消飲組與模型對照組比較和模型對照組與空白對照組比

5、較共同表達的通路為：藥物代謝細胞色素P450通路，共同表達的基因為：Kcnq2、LOC102548590、Cyp2b12、Cyp2b21、Aldh1a1、Cyp2d3、Arnt2。
　　結論：
　　1.溫陽消飲法可以減少λ-角叉菜膠誘導的胸腔積液模型大鼠的胸腔積液量。
　　2.利用基因芯片技術對胸腔積液模型大鼠腎髓質進行差異基因分析，發(fā)現(xiàn)溫陽消飲方與去桂消飲方可能是通過上調Mcpt8I3基因調控神經(jīng)活性配體受體相互作用

6、通路，參與炎癥反應。
　　3.溫陽消飲組與去桂消飲組在腎髓質組織的pathway分析中存在差異，溫陽消飲方可能是通過上調Mcpt8I3基因調控腎素血管緊張素系統(tǒng)通路達到利尿消飲的目的。
　　4.利用基因芯片技術對胸腔積液模型大鼠空腸組織進行pathway分析，去桂消飲組未發(fā)現(xiàn)有與利尿作用相關的通路，而溫陽消飲方可能通過調控甾類激素生物合成通路，抑制醛固酮的合成來達到利尿的作用。
　　5.本研究中未發(fā)現(xiàn)cAMP-PKA/