Bim在胞質M-CSF抑制乳腺癌MCF-7細胞凋亡中的作用及機制.pdf

1、目的：探討B(tài)im對轉染胞質巨噬細胞集落刺激因子（M-CSF）人乳腺癌MCF-7細胞凋亡的影響及PI3K/Akt/FoxO3a信號通路在其中的作用。
　　方法：以胞質穩(wěn)定轉染M-CSF的 MCF-7細胞系為研究對象。采用Western blotting檢測M-CSF、PI3K/Akt/FoxO3a信號通路蛋白及Bim、MST1的表達。流式細胞術、Hoechst33258染色檢測細胞的凋亡率；免疫熒光和Western blotting

2、檢測FoxO3a的亞細胞定位。
　　結果：
　　1、胞質M-CSF下調MCF-7細胞MST1、Bim的表達（p<0.05）；胞質M-CSF可降低MCF-7細胞凋亡率。
　　2、胞質M-CSF下調MCF-7細胞胞核FoxO3a的表達（p<0.05），上調胞質FoxO3a的表達（p<0.05），并促使FoxO3a向胞質轉位。
　　3、胞質M-CSF上調MCF-7細胞p-MST1、p-FoxO3a的表達（p<0.05）

3、；PI3K抑制劑LY294002逆轉胞質M-CSF誘導的Bim、MST1表達的下調及凋亡率的降低（p<0.05），促進FoxO3a向胞核的易位。
　　4、MST1-siRNA沉默MST1的表達，促進FoxO3a S253位點的磷酸化（p<0.05），并進一步下調Bim的表達（p<0.05）。
　　結論：
　　1、胞質M-CSF通過下調Bim的表達抑制乳腺癌MCF-7細胞的凋亡。
　　2、FoxO3a蛋白的核內外遷