衰老對AhR及其血管生成相關(guān)因子表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　探討芳香烴受體（aryl hydrocarbon receptor,AhR）在過氧化氫（H2O2）誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）衰老模型中表達(dá)的變化情況及其對血管生成相關(guān)因子表達(dá)的影響。
　　方法：
　　將人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs）作為正常對照組，實(shí)驗(yàn)組采用不同濃度的H2O2（100μM,200μM,300μM）氧化

2、損傷HUVECs誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞衰老制作成衰老內(nèi)皮細(xì)胞模型。首先用β-半乳糖苷酶染色觀察細(xì)胞藍(lán)染情況，通過計(jì)算藍(lán)染細(xì)胞占總細(xì)胞數(shù)的百分比確定HUVECs衰老程度。然后采用Western blot方法檢測不同衰老水平HUVECs中AhR蛋白的表達(dá)情況以及血管生成相關(guān)因子—低氧誘導(dǎo)因子-1α（hypoxia-inducible factor-1α，HIF-1α）蛋白表達(dá)的變化，采用ELISA方法檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清液中血管內(nèi)皮生長因子（vascul

3、arendothelial growth factor,VEGF）表達(dá)的變化。
　　結(jié)果：
　　與對照組相比，經(jīng)過不同濃度H2O2氧化損傷處理后，人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞均出現(xiàn)內(nèi)皮細(xì)胞衰老表現(xiàn)。隨著H2O2處理濃度的增加，AhR蛋白表達(dá)顯著增加，而HIF-1α、VEGF蛋白表達(dá)明顯減少，均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，其中200μM H2O2損傷模型組和300μM H2O2損傷模型組呈現(xiàn)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.001）。且各組均呈現(xiàn)出劑量依賴性，