多巴胺Ⅱ型受體阻斷劑硫利達嗪殺傷人卵巢癌細胞機制的研究.pdf

1、目的：
　　探討多巴胺二型受體（DR2）阻斷劑硫利達嗪對人卵巢癌細胞株SKOV3，A2780增殖，凋亡及自噬的影響及其可能的作用機制。
　　方法：
　　將人卵巢癌細胞SKOV3,A2780按既定時間暴露于不同濃度硫利達嗪后：CCK8法檢測細胞增殖情況；流式細胞術檢測細胞凋亡率；DCFH-DA法染色檢測ROS水平；“彗星實驗”觀察細胞核DNA損傷；免疫熒光檢測自噬相關蛋白LC-3的表達定位；Western blot檢測D

2、R2，cleaved caspase-3,Nrf2,p-Nrf2,NQO1,HO-1,HIF-1,VEGF,LC-3，P62，JNK,p-JNK,p38,p-p38,ERK,p-ERK,AKT,p-AKT等蛋白的表達。
　　結果：
　　硫利達嗪實驗組DR2表達下調，同時人卵巢癌細胞增殖受到明顯抑制并呈時間-劑量效應關系(p<0.05)；實驗組人卵巢癌細胞凋亡率高于對照組（P<0.05）且凋亡相關蛋白cleaved caspa

3、se-3表達明顯上調；硫利達嗪實驗組ROS水平明顯升高（P<0.05），抗氧化應激相關蛋白p-Nrf2及其下游相關蛋白如：NQO1, HO-1, HIF-1， VEGF等明顯下調；實驗組彗星形成率明顯高于對照組（P<0.05）；硫利達嗪誘導自噬發(fā)生，與對照組相比較，實驗組自噬相關蛋白LC3-II明顯上調，P62明顯下調，且具有一定的時間依賴性及劑量依賴性；用3-MA抑制自噬，實驗組凋亡率增加（P<0.05）；信號通路：P-AKT及P-P

4、38表達下調，P-ERK表達上調。
　　結論：
　　多巴胺II型受體（DR2）阻斷劑硫利達嗪抑制人卵巢癌細胞增殖效應可能與DR2表達抑制相關。誘導ROS產(chǎn)生,抗氧化應激系統(tǒng)失衡及 DNA損傷可能是硫利達嗪誘導人卵巢癌細胞凋亡發(fā)生的潛在機制。硫利達嗪也可能通過ERK/AKT信號通路誘導自噬發(fā)生，抑制自噬后，細胞凋亡增強，表明自噬在硫利達嗪發(fā)揮細胞毒性作用過程中可能起到保護作用。DR2可能成為卵巢癌治療的新靶點，DR2阻斷劑硫利