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文檔簡介
1、目的:探討彈性蛋白肽對髓樣樹突狀細(xì)胞表面共刺激分子表達(dá)的影響
方法:利用含有40ng/mL小鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)、10ng/mL白介素4(IL-4)和10％胎牛血清(FBS)的RPMI1640培養(yǎng)基刺激誘導(dǎo)小鼠骨髓來源的單個(gè)核細(xì)胞增殖分化為符合實(shí)驗(yàn)要求的高純度未成熟髓樣樹突狀細(xì)胞(imDC)，收集細(xì)胞隨機(jī)分為空白對照組及彈性蛋白肽組:空白對照組不加任何刺激，彈性蛋白肽組加入終濃度為1ug/mL的彈性蛋白
2、肽（elastin peptide，VGVAPG）刺激，兩組細(xì)胞在相同條件下繼續(xù)培養(yǎng)24h。然后收集細(xì)胞利用流式細(xì)胞技術(shù)和RT-PCR技術(shù)檢測樹突狀細(xì)胞表面共刺激分子CD40、CD80和CD86的表達(dá)變化，ELISA法檢測培養(yǎng)細(xì)胞上清液細(xì)胞因子白介素6(IL-6)和轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)的水平變化。
結(jié)果:流式細(xì)胞術(shù)及RT-PCR檢測均顯示，空白對照組樹突狀細(xì)胞表面共刺激分子表達(dá)較低，彈性蛋白肽刺激后，樹突狀細(xì)胞表面共刺
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