膠囊滲透壓泵控釋rmIGFBPrP1對小鼠肝腎組織的影響及意義.pdf

1、目的：
　　 膠囊滲透壓泵植入野生型小鼠皮下并持續(xù)恒量釋放重組鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白相關蛋白1（rmIGFBPrP1），觀察小鼠肝腎組織纖維化相關指標的表達情況，探討rmIGFBPrP1對小鼠肝腎組織的影響及其可能的意義。
　　 方法：
　　 將26只雄性C57BL/6 野生型小鼠按隨機數(shù)字表法分為3組：正常對照組（8只），常規(guī)飲食持續(xù)4周；假手術組（8只），背部僅做一橫向切口，縫合，常規(guī)飲食持續(xù)4周；模型組

2、（10只），用1％水合氯醛麻醉小鼠，于小鼠前腿之間后背部行一0.5 厘米左右橫切口。用組織鉗由切口處皮下向小鼠尾部方向撐出一個膠囊大小的空間，空間應大到膠囊泵體可以有一點移動，但不能讓泵體輕易滑到小鼠側(cè)翼去。行手術植入注滿rmIGFBPrP1溶液的膠囊滲透壓泵，輸藥管釋出口要朝內(nèi)塞入皮下，不可反向以致釋出口剛好在傷口之下。膠囊泵連續(xù)恒定釋放100μg/ml rmIGFBPrP1溶液，泵容積90μl，泵速0.11μl/h，持續(xù)4周。4周末

3、處死各組小鼠，采集肝腎組織。HE 染色和飽和苦味酸-天狼星紅染色觀察肝腎組織形態(tài)學改變及膠原沉積情況；免疫組織化學染色檢測肝腎組織中IGFBPrP1、Smad3、p-Smad2/3和Ⅲ型膠原（Col lagen Ⅲ）的表達和分布；原位末端轉(zhuǎn)移酶標記法（TUNEL）檢測肝細胞凋亡情況。
　　 結(jié)果：
　　 與對照組和假手術組相比，模型組肝組織中膠原纖維含量增多，IGFBPrP1、Smad3、p-Smad2/3、Collag

4、en Ⅲ表達增強（P＜0.01）。模型組腎組織中僅IGFBPrP1表達較對照組和假手術組有所增強，膠原纖維和其它指標表達未見差異（P＞0.05）。TUNEL 結(jié)果顯示模型組肝細胞凋亡數(shù)目增多，與正常組和假手術組相比，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。
　　 結(jié)論：
　　 1.外源性IGFBPrP1可促進小鼠肝細胞凋亡和肝纖維化的形成，而對小鼠腎組織影響甚微。
　　 2.IGFBPrP1致小鼠臟器組織纖維化可能具有