活性氧誘導(dǎo)心肌細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶的激活及其分子機(jī)理.pdf

1、目的：
　　1、觀察不同濃度的過氧化氫對(duì)心肌細(xì)胞H9C2中基質(zhì)金屬蛋白酶活性的影響。
　　2、探究過氧化氫對(duì)心肌細(xì)胞 H9C2中基質(zhì)金屬蛋白酶的激活的信號(hào)通路：JNK/EMMPRIN/MMPs。
　　方法：
　　建立心肌細(xì)胞H9C2的細(xì)胞培養(yǎng)模型，在CO2的濃度為5％且37℃恒溫的孵箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。
　　分組：（1）正常對(duì)照組（2）過氧化氫不同濃度和時(shí)間干預(yù)組（3）過氧化氫一定的時(shí)間濃度+JNK抑制劑干預(yù)組<

2、br>　　方法：通過 Western Blot也稱為蛋白質(zhì)印跡法來測(cè)心肌細(xì)胞的蛋白量的表達(dá)（通過計(jì)算所得條帶的灰度值比較）。
　　結(jié)果：
　　H2O2干預(yù)24h，MMP-2對(duì)照組（1.0±0.04）vs200組（1.7±0.04），P<0.05，顯示MMP-2在用H2O2干預(yù)濃度200umol/L時(shí)表達(dá)增高。H2O2干預(yù)24h，MMP-9對(duì)照組（1.0±0.04）vs200組（2.14±0.02），P<0.05，顯示MMP-

3、9在用H2O2干預(yù)濃度200umol/L時(shí)表達(dá)增高。MMP-2對(duì)照組（1.0±0.04）vs JNK抑制劑組（0.7±0.02）， P<0.05，顯示 MMP-2在用 JNK抑制劑干預(yù)后蛋白表達(dá)會(huì)降低。P-JNK對(duì)照組（1.0±0.04）vs JNK抑制劑組（0.6±0.02），對(duì)照組（1.0±0.04）vsH2O2干預(yù)組（1.7±0.04）（H2O2干預(yù)濃度為200 umol/L,24h），組間比較，P<0.05，顯示P-JNK在用J

4、NK抑制劑干預(yù)后蛋白表達(dá)會(huì)降低,且H2O2可以使P-JNK蛋白表達(dá)增高。MMP-9對(duì)照組（1.0±0.04）vs JNK抑制劑組（0.7±0.02），P<0.05，顯示MMP-9在用JNK抑制劑干預(yù)后蛋白表達(dá)會(huì)降低。EMMPRIN對(duì)照組（1.0±0.04）vs JNK抑制劑組（0.65±0.02），P<0.05，顯示EMMPRIN在用JNK抑制劑干預(yù)后蛋白表達(dá)會(huì)降低。
　　結(jié)論：
　　用過氧化氫的終濃度為200umol/L并