小枝玫瑰的活性篩選與成分含量測(cè)定.pdf

1、目的:優(yōu)選小枝玫瑰總黃酮的最佳提取工藝。測(cè)定維藥小枝玫瑰花中沒(méi)食子酸、槲皮素、木犀草素的含量。觀(guān)察小枝玫瑰提取物對(duì)Ⅰ型糖尿病小鼠血糖及糖耐量的影響。觀(guān)察其在降低高血糖、高血脂等方面的作用，以期為小枝玫瑰綜合利用和產(chǎn)品開(kāi)發(fā)提供參考。
　　方法:1在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，采用L9(34)正交試驗(yàn)考察體積分?jǐn)?shù)、料液比、提取時(shí)間3個(gè)因素對(duì)提取的影響，優(yōu)選小枝玫瑰總黃酮最佳提取工藝。2采用反相高效液相色譜法測(cè)定沒(méi)食子酸、槲皮素、木犀草素的含量，

2、色譜柱為C18（250mm×4.6mm，5μm），流動(dòng)相分別為:甲醇-0.3％磷酸(6∶94)、甲醇-0.2％磷酸(63∶37)、甲醇-0.2％磷酸(50∶50);檢測(cè)波長(zhǎng)分別:為272nm、370nm、350nm;3通過(guò)急性毒性實(shí)驗(yàn)研究，測(cè)定小枝玫瑰的最大耐受量MTD，兩周內(nèi)每天觀(guān)察并記錄小鼠體征變化及生理反應(yīng)。4通過(guò)采用鏈脲佐菌素(STZ)、四氧嘧啶所致糖尿病模型小鼠，血糖試紙法測(cè)定血糖，觀(guān)察小枝玫瑰提取物對(duì)糖尿病小鼠（Ⅰ、Ⅱ型）血

3、糖的影響，同時(shí)進(jìn)行葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)(OGTT)，觀(guān)察玫瑰提取物對(duì)糖尿病小鼠糖耐量的改善作用。5通過(guò)喂養(yǎng)高脂飼料建立高脂血癥大鼠模型，確定小枝玫瑰提取物對(duì)實(shí)驗(yàn)性高血脂大鼠的降血脂作用。
　　結(jié)果:1.得到小枝玫瑰總黃酮最佳提取工藝條件為A2B3C1，即用50％的乙醇，以1∶16的料液比加熱回流30min。小枝玫瑰總黃酮提取量平均值為66.60mg/g。2.沒(méi)食子酸質(zhì)量濃度在5.05～101μg/ml范圍內(nèi)峰面積線(xiàn)性關(guān)系良好(r=0.9

4、999)回歸方程為:Y=32582.34X+16156.67，平均回收率為100.15％，RSD為1.39％，小枝玫瑰花中沒(méi)食子酸含量為4.9173mg/g;槲皮素進(jìn)樣量在0.0804～0.402μg范圍內(nèi)呈良好的線(xiàn)性關(guān)系，回歸方程為:Y=541.62X-1.146，r=0.9999，平均回收率為99.70％，RSD為1.27％，小枝玫瑰花中槲皮素含量為0.2598mg/g;木犀草素在進(jìn)樣量0.1632～0.816μg范圍內(nèi)呈良好的線(xiàn)性

5、關(guān)系，回歸方程為:Y=7090981.62X-37746.20，r=0.9999，平均回收率為101.45％，RSD為1.71％，小枝玫瑰花中木犀草素含量為0.0884mg/g;3.小鼠急性毒性實(shí)驗(yàn)測(cè)出小枝玫瑰醇提物的最大耐受量MTD為3.12g（生藥）/kg。4.各組小枝玫瑰提取物均能降低糖尿病小鼠血糖含量，且呈一定量效關(guān)系，醇提物和水提物均以大劑量效果為好，在所有提取物中以醇提物大劑量效果最好，但效果不及陽(yáng)性對(duì)照藥物鹽酸二甲雙胍組。

6、小枝玫瑰提取物均能改善其糖耐量。5.通過(guò)建立高血脂模型，確定小枝玫瑰醇提物高、中、低劑量組組(686.32 mg/kg、343.16 mg/kg、171.56mg/kg)均可使大鼠血清中TC、TG、LDL-C水平下降，HDL-C水平顯著性升高，具有降血脂作用。
　　結(jié)論:1.本課題首次對(duì)維吾爾特色藥材小枝玫瑰玫瑰花中總黃酮提取工藝進(jìn)行優(yōu)選，得到了最優(yōu)的提取工藝。2.高效液相色譜法方法簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確，重復(fù)性好，可用測(cè)定小枝玫瑰花中沒(méi)食子