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文檔簡介
1、水稻紅蓮型細胞質雄性不育(HL-CMS)的育性恢復受Rf5和Rf6共同控制。Rf5定位于第10號染色體,編碼的蛋白RF5能與GRP162形成復合物,識別并催化atp6-orfH79轉錄本剪切。但Rf6定位于水稻8號染色體上,功能不十分清楚,本研究對Rf6的研究,取得了如下結果:
1、根據(jù)Rf6定位信息,克隆了預測的具有PPR結構域的Rf6及rf6基因。根據(jù)Rf6和rf6序列差異性開發(fā)了區(qū)分兩個基因的分子標記。含Rf6基因的材料
2、能擴增出750 bp左右的特異條帶,而含有rf6基因的材料可擴增出400 bp左右的特異條帶,這一分子標記可用于恢復系的輔助選擇。
2、構建了Rf6的植物超表達載體,通過農桿菌介導的遺傳轉化YTB和YTA,通過PCR鑒定,分別獲得了Rf6轉YTB的陽性植株11株和轉YTA陽性植株5株。
3、構建了Rf6開放閱讀框的原核表達載體,轉入大腸桿菌BL21(DE3)中。20℃,0.3 mmol/L IPTG誘導4 h條件下,
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