骨折愈合過程中歸巢現(xiàn)象及相關因子的表達.pdf

1、目的：應用干細胞、細胞因子等技術修復骨折后損傷是近年來骨科領域的研究熱點.為了使骨折愈合,首先要有足夠數(shù)量的干細胞到達骨折區(qū)域,并在這一區(qū)域停留足夠長的時間。然而,目前各文獻中關于骨折后干細胞歸巢到骨折部位的報道很少,對于引起這一變化的機制更是所知甚少。本研究擬建立大鼠的右側股骨骨折動物模型,分別檢測其骨折后不同時間點骨折部位相關蛋白因子表達變化情況,并與左側股骨對照進行比較,以研究骨折愈合過程中干細胞歸巢到骨折部位的機制和相關因子的表

2、達。
　　 方法：第一部分采用貼壁培養(yǎng)法體外分離、培養(yǎng)大鼠間充質干細胞(Meseuchymal Stem Cells,MSCs),用流氏細胞儀測定細胞表型。用PKH-26標記MSCs。第二部分,24只大鼠隨機分為A、B和c三組,每組8只,建立右側股骨骨折模型,左側為對照.將標記好的細胞注入大鼠股骨骨折模型中,觀察細胞的示蹤情況。移植后3、7和14天分別處死A、B和C三組大鼠,取出雙側股骨,左側為對照,用熒光成像系統(tǒng)檢測干細胞歸巢

3、情況。最后,取不同三組大鼠的雙側股骨組織,右側股骨為實驗組,左側股骨為對照,經固定,脫鈣制作病理切片,共聚焦顯微鏡聯(lián)合免疫組化技術,觀察MSCs移植后在不同時點的分布和相關因子的表達。
　　 結果：大鼠MSCs為均一的梭形的成纖維細胞樣生長,貼壁及增殖能力強；流式細胞術鑒定為間充質干細胞。A組骨折部位熒光標記的MSCs細胞數(shù)明顯高于對照組。B和C組骨折端干細胞歸巢明顯多于健側,也多于A組骨折端。B、C兩組骨折部位干細胞歸巢無明顯