伯胺雙膦酸藥物的HPLC測(cè)定和大黃中蒽醌類物質(zhì)的GC-MS測(cè)定.pdf

1、第一部分：伯胺雙膦酸藥物的HPLC測(cè)定
　　雙膦酸鹽類藥物是一種高效骨吸收抑制劑，臨床上用于骨骼上各種相關(guān)疾病（如骨質(zhì)疏松癥、變形性骨炎以及惡性高鈣血等）的治療。該類藥物大部分為口服給藥，生物利用度低，而由于其極性很強(qiáng)，不便于分離富集，在反相色譜柱上難以保留。并且大多數(shù)的雙膦酸鹽類藥物沒(méi)有生色團(tuán)，所以無(wú)法采用常規(guī)紫外檢測(cè)器或熒光檢測(cè)器直接進(jìn)行測(cè)定。
　　阿侖膦酸鈉、帕米膦酸二鈉以及奈立磷酸都屬于雙膦酸藥物的伯胺類化合物，能有

2、效地抑制骨吸收，副作用小，安全性好，在臨床上廣泛用于骨質(zhì)疏松癥、變形性骨炎以及腫瘤相關(guān)性骨病變等疾病。因此建立快速檢測(cè)該類藥物的分析方法具有重要的理論和現(xiàn)實(shí)意義。本文使用常用的氨基酸柱前衍生化試劑芴甲氧羰酰氯（FMOC-Cl）與三種雙膦酸藥物反應(yīng)，再經(jīng)HPLC-UV法實(shí)現(xiàn)藥物的定量檢測(cè)。
　　目的：以FMOC-Cl為柱前衍生化試劑，與三者分別進(jìn)行反應(yīng)，建立阿侖膦酸鈉、帕米膦酸二鈉、奈立膦酸柱前衍生化HPLC-UV的測(cè)定方法，分別測(cè)

3、定阿侖膦酸鈉片、注射用帕米膦酸二鈉及奈立膦酸原料藥的含量。方法：流動(dòng)相為甲醇-乙腈-0.4％EDTA(5:25:70)，氫氧化鈉調(diào)節(jié)流動(dòng)相pH至7.16；采用色譜柱LinkSi C18(250×4.6 mm，5.0μm)；流速v=1.0mL·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)264nm。結(jié)果：三種藥物在1.0-40.0μg·mL-1范圍內(nèi)均呈現(xiàn)良好的線性（r＞0.9995），各藥物的回歸方程跟檢測(cè)限分別為：阿侖膦酸鈉：y=0.941x-0.697，檢

4、測(cè)限0.2μg·mL-1。帕米膦酸二鈉：y=0.447x-0.240，檢測(cè)限為0.5μg·mL-1。奈立膦酸：y=0.730x-0.316，檢測(cè)限為0.1μg·mL-1。結(jié)論：該HPLC-UV法測(cè)定三種雙膦酸藥物靈敏，準(zhǔn)確度高，可以用來(lái)測(cè)定各原料藥及制劑的含量。
　　第二部分：大黃中蒽醌類物質(zhì)的GC-MS測(cè)定
　　大黃屬于我國(guó)傳統(tǒng)中藥，具有廣泛的藥理作用。尤其對(duì)于實(shí)熱便秘、食積停滯、腹痛、急性闌尾炎、急性傳染性肝炎、急性結(jié)膜

5、炎等疾病有很好的療效?，F(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)表明大黃中所含的蒽醌類化合物具有廣譜的生物活性，也是其療效的主要組成部分。已有文獻(xiàn)對(duì)大黃的化學(xué)成分進(jìn)行了研究，最主要的活性成分為蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚這些游離蒽醌。目前對(duì)大黃蒽醌類化合物的測(cè)定主要采用HPLC法。本文則用GC-MS法，對(duì)大黃中的四種蒽醌化合物經(jīng)過(guò)全掃描，確定其選擇離子后進(jìn)行定量檢測(cè)，專一性好，靈敏度高，為該類化合物生物樣品的分析提供了參考。同時(shí)通過(guò) EI-MS法對(duì)

6、四種分析物的主要裂解途徑及可能產(chǎn)生的碎片離子進(jìn)行分析，為進(jìn)一步研究四種化合物的結(jié)構(gòu)修飾以及該類藥物的新藥研發(fā)提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　目的：建立GC-MS同時(shí)測(cè)定大黃中大黃酚、大黃素甲醚、蘆薈大黃素和大黃素含量的方法。通過(guò)EI-MS法對(duì)四種分析物的主要裂解途徑及可能產(chǎn)生的碎片離子進(jìn)行分析。方法：TG-5MS(30m×0.25 mm×0.25μm)毛細(xì)管色譜柱，蛇床子素作為內(nèi)標(biāo)，用乙酸乙酯溶解樣品，選擇離子監(jiān)測(cè)法定量。電子轟擊質(zhì)譜（EI