復方庚酸炔諾酮注射液細菌內毒素檢測方法研究.pdf

1、目前國內外藥品中熱原的檢測方法主要有熱原檢測法和細菌內毒素檢測法。隨著人們對熱原本質的深入認識，目前普遍的觀點認為藥品中沒有細菌內毒素檢出也就沒有熱原性物質。半個多世紀以來，采用家兔法（PT法）檢查熱原曾對保證藥品的安全發(fā)揮了重要的作用，但是家兔法耗時長，不經濟，且有很多局限性。細菌內毒素檢查法（BET法）因其簡便、靈敏、快速、準確等優(yōu)點，已被廣泛用于檢查藥品注射劑及其原料藥和臨床醫(yī)療器具中的致熱物質。作為體外熱原檢查法的細菌內毒素檢查

2、法逐步替代傳統(tǒng)的PT法檢查熱原成了必然趨勢。
　　復方庚酸炔諾酮注射液在《中國藥典》2010版中有收載，其質量指標中沒有細菌內毒素檢測項，但企業(yè)標準中有熱原檢測項，由于試驗中以兔子作為試驗對象，在國際對動物保護呼聲日趨高漲的形勢下，開發(fā)合適的細菌內毒素檢測方法來替代熱原檢查就成了必然的發(fā)展趨勢。本文參照藥品細菌內毒素檢查的實驗設計，研究開發(fā)復方庚酸炔諾酮注射液適宜的細菌內毒素檢測方法，來替代熱原檢查法，并對其可行性進行確認。

3、>　　本文先從對細菌內毒素檢測方法與熱原檢測方法的優(yōu)缺點分析開始，確定用細菌內毒素檢測方法中的鱟試劑凝膠法來檢測復方庚酸炔諾酮注射液中的細菌內毒素值。進而分析了各種影響到鱟試劑凝膠法結果的因素，并在試驗中避免。依據細菌內毒素檢查法的建立原則開展復方庚酸炔諾酮注射液細菌內毒素檢測方法的建立。
　　復方庚酸炔諾酮注射液為非水溶性油溶液，故無法將其中所含的細菌內毒素直接利用鱟試劑凝膠法檢測。先將復方庚酸炔諾酮注射液按注射用油的方法，即與

4、水混合振蕩后在2500r/min下離心分離處理10min后將細菌內毒素從油溶液中萃取到水中，但樣品陽性管不凝集，故只能尋找其他合適的方法來檢測其細菌內毒素限值。分析原因可能是復方庚酸炔諾酮注射液中所含的原藥或輔料起到了干擾作用，就選擇了親水性強的聚山梨酯-80，先將復方庚酸炔諾酮注射液乳化后形成乳濁液后再進行細菌內毒素檢測。通過干擾試驗證明，該處理方法能有效地用鱟試劑凝膠法檢測出復方庚酸炔諾酮注射液中的細菌內毒素。
　　通過于熱原