去鐵蛋白為模板和載體的納米合成及其在生物分子檢測中的應用研究.pdf

1、近年來,以蛋白質為模板合成納米材料引起了人們濃厚的研究興趣。此方法合成的材料既具有納米材料的特性,又具有蛋白質的生物相容性,在生物分子固定化、食品工業(yè)、生物傳感等方面均展現(xiàn)出其優(yōu)勢。本論文以納米去鐵蛋白為模板,合成了納米金屬硫化物,并以去鐵蛋白為生物載體,制備出葡萄糖氧化酶-生物素/鏈霉親和素/生物素-去鐵蛋白(Apo-GOx)酶納米復合材料,成功用于低濃度的葡萄糖和凝血酶的檢測。主要工作如下:
　　 1.對鐵蛋白和去鐵蛋白的結

2、構與特性、納米材料特性及其蛋白模板合成方法、酶固定方法及適配體生物傳感技術進行簡要綜述,并在此基礎上提出本論文的基本構思。
　　 2.以去鐵蛋白為反應器,在水相中利用擴散法合成粒徑大小一致、具有電化學性質的納米金屬硫化物。采用透射電子顯微鏡表征其粒度、形貌和結構,采用差分脈沖伏安(DPV)法對金屬離子進行電化學檢測,并分別計算出每個去鐵蛋白空殼中鋅離子和鎘離子的平均容納量。對裝載金屬硫化物的去鐵蛋白納米粒子進行表面醛基修飾,并采

3、用消色品紅分光光度法對醛基進行定量分析。醛基修飾后的裝載金屬硫化物的去鐵蛋白納米粒子可作為生物探針,在化學、生物、醫(yī)藥等方面可得到應用,裝載多組分金屬硫化物的去鐵蛋白納米粒子有望作為多信號生物標記探針用于生物分子檢測。
　　 3.利用鏈霉親和素與生物素之間的生物親和作用,以鏈霉親和素為鏈接分子,去鐵蛋白為生物載體,合成葡萄糖氧化酶-生物素/鏈霉親和素/生物素-去鐵蛋白酶納米復合材料(Apo-GOx),通過透射電鏡、紫外光譜和熒光