以大豆為基質(zhì)的富硒靈芝固態(tài)發(fā)酵的研究.pdf

1、靈芝為靈芝屬(Ganoderma)真菌其學(xué)名[Ganoderma Lucidum(Fr.)Karst]，在我國有著悠久的藥用史，被列為名貴中草藥。靈芝不僅含有豐富的蛋白質(zhì)、氨基酸、靈芝多糖、維生素以及其他活性物質(zhì)，而且還具有很強的富硒能力，所富集的硒主要以硒蛋白、硒多糖、硒核酸等有機態(tài)硒的形式存在。硒是人體必需的微量元素之一，缺硒會導(dǎo)致多種疾病。據(jù)研究表明，有機態(tài)硒相對無機態(tài)硒具有良好的穩(wěn)定性，易于吸收利用。然而正常菌體中有機硒含量較低

2、，如果在富含無機硒的培養(yǎng)基料中接入靈芝菌種，利用靈芝菌的富硒能力將無機態(tài)硒轉(zhuǎn)化為有機態(tài)硒，融靈芝和有機硒之長，其藥用價值更高。因此目前以靈芝菌絲體為載體進行硒的生物轉(zhuǎn)化，開發(fā)有機形態(tài)、成本低廉的硒制品成為新熱點。本文以11種豆類為原料，接入靈芝液體菌種，通過固態(tài)發(fā)酵，篩選出最適宜靈芝生長的豆類作物，然后在不同亞硒酸鈉濃度條件下進行靈芝液體發(fā)酵富集硒的培養(yǎng)，確定最佳的富硒條件，在最佳的富硒條件下培養(yǎng)的液體菌種接種于最佳豆類基質(zhì)中，通過響應(yīng)

3、面法確定最佳固態(tài)發(fā)酵條件，并對發(fā)酵物成分進行測定分析，然后添加不同輔料制成速溶茶粉，既提高靈芝菌絲體的營養(yǎng)價值又提高大豆的附加值，為靈芝保健品開發(fā)提供理論和實踐依據(jù)。主要試驗方法和結(jié)果如下：
　　 1、采用大豆、紫云豆、扁豆、白豌豆、青豆、黑豆、青豌豆、綠豆、花云豆、紅云豆、白云豆等11種豆類作為靈芝發(fā)酵的天然固態(tài)培養(yǎng)基，接種靈芝菌絲體進行發(fā)酵，對這些天然豆類培養(yǎng)基進行了篩選。結(jié)果表明：在所有豆類中，以大豆作為天然培養(yǎng)基進行靈芝

4、固態(tài)發(fā)酵時，所獲得的游離氨基酸的含量最高，達169.55mg/100g；
　　 2、研究了靈芝菌絲體在亞硒酸鈉水平分別為50μg/mL、100μg/mL、150μg/mL、200μg/mL、250μg/mL、300μg/mL、350μg/mL、400μg/mL，的固體PDA培養(yǎng)基上的生長情況，30℃恒溫培養(yǎng)6d，測定菌落直徑；在不同亞硒酸鈉濃度條件下進行液體發(fā)酵，180r/min，30℃搖床培養(yǎng)5d，檢測發(fā)酵液生物量及富硒率，同

5、時檢測富硒后菌絲體部分金屬元素的含量。結(jié)果表明：150～250μg/mL的含硒固體PDA培養(yǎng)基上菌絲體生長好，在含硒250μg/mL液體發(fā)酵培養(yǎng)基上菌絲體生物量最高為0.86g，亞硒酸鈉濃度為300μg/mL發(fā)酵液靈芝菌絲體富硒率最高，為47.71％，而且富硒后的菌絲體其他金屬元素含量變化不明顯。
　　 3、應(yīng)用Box-Benhnken的中心組合試驗設(shè)計原理，選取接種量、培養(yǎng)時間、培養(yǎng)溫度對游離氨基酸含量影響顯著的3個因素，采用

6、三因素三水平的響應(yīng)面分析方法對靈芝固體發(fā)酵的條件進行優(yōu)化，得出最佳發(fā)酵條件：接種量為10.53％，培養(yǎng)時間為6.68d，培養(yǎng)溫度為29.34℃，得到游離氨基酸的總量為280.56mg/100g。
　　 4、對以大豆為基質(zhì)的富硒靈芝固態(tài)發(fā)酵物成分分析其水分含量11.95％，灰分含量4.17％，粗脂肪含量5.79％，粗纖維含量20.06％，有機態(tài)的硒含量0.036％。通過正交試驗對靈芝發(fā)酵物速溶茶浸提條件進行研究得出最佳浸提條件是蒸