油茶粕多肽的生物活性及其安全性評價.pdf

1、本文以油茶粕蛋白為原料，研究了酶解所得油茶粕多肽的抗氧化活性、抑菌活性及安全性，主要試驗結果如下：
　　 本研究以抗亞油酸過氧化能力為指標，對Alcalase、Papain、Trypsin、Flavorzyme、Neutrase等5種蛋白酶進行了篩選，并運用軟件Design-Expert7.1Trial，確定了酶解油茶粕蛋白制備抗氧化肽的最佳工藝參數(shù)。結果表明：采用Alcalase酶解油茶粕蛋白明顯優(yōu)于其它4種蛋白酶，其酶解最佳

2、條件為pH值8.3，底物濃度16.8 mg/g，反應溫度48.8℃，反應時間6.5 h。此時所得油茶粕多肽對亞油酸過氧化抑制率為60.83％±0.57％(n=3)，與預測值61.86％非常相近，說明采用響應面法優(yōu)化得到的酶解參數(shù)是可靠的，具有可行性。
　　 通過測定所得油茶粕多肽的還原能力、清除羥自由基(OH·)能力、對Fe2+螯合能力及清除DPPH自由基能力，進一步研究了油茶粕多肽的體外抗氧化作用。結果表明：油茶粕多肽具有較強

3、清除羥自由基(OH·)、DPPH自由基的能力，其IC50值分別為0.181g/L和0.367g/L，分別是維生素C的IC50值的1.56倍和52.4倍。油茶粕多肽螯合Fe2+的IC50值約為EDTA的3890倍。通過動物實驗分析了油茶粕多肽對小鼠抗氧化功能的調節(jié)作用。灌胃四氯化碳使小鼠肝中毒，1 h后分別灌胃不同量的油茶粕多肽溶液，24 h后測定小鼠肝臟中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的活性以及丙二醛(MD

4、A)的含量，結果表明油茶粕多肽能顯著降低小鼠肝臟中MDA的含量，恢復SOD及GSH-PX的活力，表現(xiàn)出很強的體內抗氧化活性。
　　 以油茶粕蛋白為原料，采用Pepsin蛋白酶水解，并對酶解工藝進行優(yōu)化。以大腸桿菌的抑菌率為指標，采用響應曲面分析法，設計了4因素5水平實驗，確定了酶解油茶粕蛋白獲取油茶粕抗菌肽的最佳工藝條件，酶添加量為0.22％，pH值為2.36，反應溫度36.82℃，反應時間為5.99 h。在此條件下，獲取的油茶

5、粕多肽對大腸桿菌的抑制率達到67.08％±0.22％(n=3)，與預測值67.32％非常相近。
　　 按照食品安全性毒理學評價程序和方法對油茶粕多肽進行急性毒理學試驗、遺傳毒性試驗和30天喂養(yǎng)試驗。采用一次最大限量法(攝入量為20.00g/kg·kw)，進行油茶粕多肽對大、小鼠急性毒性試驗，無死亡；小鼠精子畸變試驗、Ames試驗和骨髓嗜多染紅細胞微核試驗結果均為陰性；30天喂養(yǎng)試驗中各項指標均未見異常。研究結果初步表明油茶粕多肽