利用麩皮生物發(fā)酵制備低聚糖的研究.pdf

1、低聚糖是一種具有適用范圍廣和應用前景好的新型產品，它集營養(yǎng)、保健、食療功能于一體，常應用于食品、保健品、飲料、醫(yī)藥、飼料添加劑等多個領域，其趨勢是將取代蔗糖成為新型功能性糖源。麩皮中含有大量的纖維素和半纖維素，開發(fā)利用麩皮中的纖維素和半纖維素制備低聚糖是當前的一個研究熱點，而利用酶法降解麩皮制備低聚糖的方法所具有的無污染、低能耗等優(yōu)點將是麩皮資源開發(fā)利用的一個趨勢。
　　 本實驗通過對里氏木霉的深入研究，得出其產酶的最佳條件，并

2、對酶進行初步的分離純化，研究各個酶的酶學性質，同時對小麥麩皮進行必要的初處理，然后用里氏木霉產生的酶來降解處理后的麩皮，通過調節(jié)各種可能的影響因素，最大量的產生低聚糖。
　　 本實驗室保藏的里氏木霉F0701是一種高產纖維素酶和半纖維酶的真菌，通過對該真菌的研究得出，在發(fā)酵過程中產生了纖維素酶系中的兩組酶系，即Cx酶、C1酶，沒有產生β-葡萄糖苷酶，另外還有木聚糖酶(Xylanase)；優(yōu)化獲得該菌株最佳產酶條件：碳源為2‰麩皮

3、、氮源為(NH4)2SO4，加入Tween20，培養(yǎng)液初始pH值4.5-5.0，在25-30℃下培養(yǎng)96-120h。
　　 然后對里氏木霉F0701發(fā)酵產生的降解酶進行初步分離純化，并研究了它們的酶學性質，得出Cx酶、C1酶和Xylanase三種酶的最適反應溫度為70℃、50℃和50℃，最適反應pH值分別為4.6、4.8和4.8，研究發(fā)現(xiàn)不同類型的無機離子對酶活有不同程度的影響，Cu2+、Mg2+、Fe2+對酶有促進作用，Mn2

4、+、Tris、Ca2+對酶有明顯的抑制作用；通過雙倒數(shù)曲線法分別測出了三種酶的Km值，C1酶為27.92mg/ml，Cx酶為17.75mg/ml，Xylanase為25.59mg/ml。
　　 在對小麥麩皮進行去除淀粉、去除蛋白質等一些必要的處理后，用里氏木霉F0701所分泌的酶液對其進行發(fā)酵降解，并運用薄層色譜和高效液相色譜對產物進行分析，然后對降解時的底物濃度、反應時間、溫度和pH值等等多種因素加以考慮，以尋找酶解的最佳工藝