羊毛TGASE酶法接枝改性機(jī)理研究.pdf

1、轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶(Transglutaminase,簡(jiǎn)稱TG)是一類可催化蛋白質(zhì)內(nèi)賴氨酸殘基上的ε-氨基和谷氨酰胺殘基上的γ-羥酰胺基胺基間結(jié)合的聚合性酶,使蛋白質(zhì)內(nèi)部形成交聯(lián)。羊毛蛋白中含有相對(duì)豐富的賴氨酸和谷氨酰胺,因此利用轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶可催化其內(nèi)部形成共價(jià)交聯(lián),進(jìn)而對(duì)羊毛接枝改性,從而改善羊毛的物理和化學(xué)性能。傳統(tǒng)的羊毛改性常常使用氯化劑及其衍生物,但氯化過(guò)程所產(chǎn)生的AOX會(huì)造成嚴(yán)重的環(huán)境污染,因此受到嚴(yán)格的限制。
　　 本課題

2、,首先采用靛酚藍(lán)分光光度法來(lái)測(cè)定MTG酶催化反應(yīng)體系所釋放的氨,研究發(fā)現(xiàn),Tris-HCl緩沖液中靛酚藍(lán)顯色法測(cè)氨不可行,而磷酸鹽緩沖液對(duì)其影響不大。通過(guò)測(cè)定MTG酶催化羊毛織物交聯(lián)反應(yīng)釋放氨量與羊毛織物強(qiáng)力和白度的對(duì)比發(fā)現(xiàn),MTG酶催化交聯(lián)的經(jīng)過(guò)KMnO4和DCCA預(yù)處理的羊毛織物,其強(qiáng)力分別恢復(fù)了6％和40％,DCCA預(yù)處理的羊毛織物其白度恢復(fù)了2％左右。而其反應(yīng)體系釋氨量卻無(wú)法檢測(cè)到,說(shuō)明MTG酶催化羊毛織物交聯(lián)釋放氨較少,不易檢

3、測(cè)。通過(guò)對(duì)羊毛蛋白模擬物--酪蛋白的MTG酶交聯(lián)釋放氨的檢測(cè),發(fā)現(xiàn)10g/L酶濃度下,反應(yīng)體系釋氨量在7.5μg/ml,證實(shí)了MTG酶對(duì)酪蛋白的催化交聯(lián)作用,最后采用自制的羊毛蛋白溶液通過(guò)對(duì)其MTG酶催化交聯(lián)釋氨的檢測(cè),16g/L酶濃度下,反應(yīng)體系釋氨量在2.5μg/ml,證明了MTG酶對(duì)羊毛蛋白溶液的交聯(lián)作用。研究發(fā)現(xiàn),還原劑DTT的加入能改變羊毛的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),反應(yīng)體系中20mmol/L的DTT能促進(jìn)MTG酶對(duì)羊毛的催化交聯(lián)作用。最后