γ-氨基丁酸高產菌株的選育.pdf

1、γ-氨基丁酸(γ-Aminobutyric acid，GABA，簡稱GABA)，又稱氨酪酸，是一種廣泛存在于原核生物和真核生物的非蛋白質氨基酸，是哺乳動物中樞神經系統中一種重要的抑制性神經遞質，對人體具有多種生理功能，如抗心律失常、降血壓、改善腦機能、調節(jié)心血管、增強記憶、鎮(zhèn)靜安神、活化肝腎。目前GABA作為重要的新型功能因子在食品藥品領域中有廣泛的應用。自然界中，GABA廣泛存在于動植物和微生物中，但GABA在動物和植物中含量較低，不

2、容易被提取，因此目前微生物是GABA的主要來源。用于生產GABA的菌株有乳酸菌、大腸桿菌和酵母菌等。
　　 本文以實驗室保存的的一株GABA產量較高乳酸片球菌(Pediococcusacidilactici)(經氨基酸分析及GABA含量測定得知，乳酸片球菌產GABA量1.062g/L)為出發(fā)菌株，經過UV誘變、NTG誘變和Uv、NTG復合誘變，得到一株產GABA較高的突變株UN-27。最佳誘變劑量為紫外照射時間20s，距離25c

3、m，NTG濃度為0.3mg/mL，誘變處理時間為60min。將UN-27連續(xù)傳代10次后，發(fā)現其遺傳性狀穩(wěn)定。經氨基酸分析儀測定，誘變后菌株GABA產量達到5.017g/L，是出發(fā)菌株產量的4.72倍。為了獲得更高的GABA產量，對UN-27的培養(yǎng)基和發(fā)酵條件進行了優(yōu)化。應用Box-Behnken響應面法對影響因素進行優(yōu)化，通過Design-Expert軟件對數據回歸擬合，得到最佳發(fā)酵培養(yǎng)基配方(g/L)為：葡萄糖15，酵母粉20，蛋白