金納米顆粒大小和覆蓋率對(duì)GOD結(jié)構(gòu)和生物活性影響研究.pdf

1、通過物理和化學(xué)吸附，蛋白質(zhì)吸附到納米顆粒表面形成異質(zhì)體。異質(zhì)體的應(yīng)用范圍比較廣，包括生物傳感器、影像學(xué)、催化、醫(yī)療、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的研究等。納米顆粒表面的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)，例如：表面曲率、粗糙度、特定幾何形狀等，能影響蛋白質(zhì)的特定結(jié)構(gòu)，進(jìn)而影響到它的生物活性。在異質(zhì)體的研究中，常用的納米顆粒有：金納米顆粒(AuNPs)、銀納米顆粒(AgNPs)、親水性和疏水性的二氧化硅納米顆粒(SNPs)等；常用的蛋白質(zhì)有溶菌酶、細(xì)胞色素C、牛血清白蛋白和真

2、菌蛋白酶等分子量小的單聚體蛋白質(zhì)。納米顆粒對(duì)分子量比較大的二聚體蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和生物活性的影響，文獻(xiàn)上報(bào)道的較少。葡萄糖氧化酶(GOD)是一種分子量較大的二聚體蛋白質(zhì)。在食品、飼料、醫(yī)藥、生物傳感器等方面具有重要的應(yīng)用價(jià)值。1904年，人們便發(fā)現(xiàn)了GOD，其結(jié)構(gòu)和生物功能已經(jīng)比較清楚，GOD常被用作模型蛋白質(zhì)來進(jìn)行科學(xué)研究。
　　 本文主要研究了“裸露”的AuNPs大小和覆蓋率對(duì)GOD結(jié)構(gòu)和生物活性的影響。利用種子生長(zhǎng)法合成了不同

3、大小的AuNPs，探究了還原劑的強(qiáng)弱對(duì)AuNPs單分散性的影響。在覆蓋率為80％的情況下，探究了不同大小的AuNPs對(duì)GOD結(jié)構(gòu)和活性的影響。此外，還探究了覆蓋率對(duì)GOD活性的影響。主要結(jié)論如下：⑴利用種子生長(zhǎng)法，還原性弱的鹽酸羥胺作為還原劑合成的AuNPs單分散性明顯優(yōu)于還原性強(qiáng)的抗壞血酸合成的；利用種子生長(zhǎng)法合成不同大小的AuNPs，要防止二次成核；半峰寬能用于比較同種方法合成的AuNPs單分散性的優(yōu)劣，不能用于不同方法合成的AuN

4、Ps單分散性的比較。⑵當(dāng)覆蓋率是80％時(shí)，“裸露”的AuNPs的大小能強(qiáng)烈地影響GOD的二級(jí)結(jié)構(gòu)和其活性中心黃素腺嘌呤二核苷酸(FAD)所處的微環(huán)境，進(jìn)而影響到它的生物活性。13nmAuNPs導(dǎo)致了GOD的α螺旋含量減少；隨著AuNPs粒徑增大，其α螺旋含量增加；隨著AuNPs粒徑減小，GOD分子的色氨酸殘基向更加極性的環(huán)境移動(dòng)，F(xiàn)AD微環(huán)境受到的擾動(dòng)增大，對(duì)于52nm和76nm的AuNPs來說，上述改變是相近的；13nmAuNPs使G