谷朊粉酶解物中抗氧化肽及ACE抑制肽的研究.pdf

1、本課題以谷朊粉為原料，采用四種不同的蛋白酶（木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、復合蛋白酶、堿性蛋白酶）酶解谷朊粉，并對酶解條件進行優(yōu)化，得到四種酶解物。對四種酶解物的抗氧化活性和血管緊張素轉換酶（ACE）抑制活性進行了研究，并且將顯示出最高抗氧化活性和ACE抑制活性的酶解物進行了分離純化及結構鑒定。研究結果如下：
　　首先，以氮溶解指數(shù)（NSI）、TCA溶解性和DPPH自由基清除能力為考察指標，通過底物濃度、加酶量、酶解時間及酶解溫度四個單

2、因素正交試驗對酶解物的酶解條件進行優(yōu)化得到具有高抗氧化活性的酶解物。以NSI、TCA溶解性和ACE抑制率為考察指標，通過底物濃度、加酶量、酶解時間及酶解溫度四個單因素正交試驗對酶解物的酶解條件進行優(yōu)化得到具有高 ACE抑制率的酶解物。實驗結果表明：抗氧化活性肽的酶解條件為：復合蛋白酶酶解，最優(yōu)條件：酶解時間3h，底物濃度25％，加酶量0.8%，酶解溫度35℃；ACE抑制肽的酶解條件為：堿性蛋白酶酶解，最有條件：酶解時間3h，底物濃度25

3、%，加酶量0.8%，酶解溫度60℃。
　　其次，通過超濾技術、葡聚糖凝膠層析和反相高效液相色譜的方法對這兩種活性肽進行逐級分離，結果表明：分子質量Mr<1 KDa組分的抗氧化活性和ACE抑制率較高，純化后的抗氧化組分的活性可達76.34%，純化后的ACE抑制組分的活性可達81.03%。
　　將這兩種活性肽通過ESI-TOF-MS的方法進行結構鑒定。研究結果表明，高抗氧化活性肽的分子量為730.83，氨基酸序列為 Gln-Gl